[0014] 为了克服现有技术缺陷，本发明提供了一种合适的改性介孔二氧化硅催化剂，以及利用所述催化剂提供了一种步骤简单、低成本的方法来制备高产率高纯度的伏立诺他，所述方法以廉价的辛二酸为起始原料，采用改性介孔二氧化硅偶联/催化体系通过一锅法制备伏立诺他，无需中间产物的分离纯化步骤，简化了反应流程，大大提高了反应效率。
[0015] 关于催化剂，经过大量研究，本发明发现，利用辛二酸酐和偶联剂改性的介孔二氧化硅材料代替现有技术中的偶联剂修饰辛二酸，可以达到偶联剂/催化剂双重效果，能够很好地促进辛二酸的选择性反应。
[0016] 具体而言，本发明提供了一种在辛二酸酐和偶联剂改性的介孔二氧化硅偶联/催化体系下通过一锅法制备伏立诺他的方法，该方法包括以下步骤：
[0017] (1)制备辛二酸酐和偶联剂改性的介孔二氧化硅作为偶联/催化剂；
[0018] (2)在混合有机溶剂中用改性介孔二氧化硅预处理辛二酸1-3 h，制备预处理液；
[0019] (3)向预处理完毕的混合液中加入羟胺或其盐酸盐反应物以及反应促进剂，搅拌反应1-2 h，生成含有中间体N-羟基-7-羧基-庚酰胺的反应混合物；
[0020] (4)无需分离纯化中间体，用碱调整上述混合液pH至10-12，加入苯胺反应2-3 h，经后处理制得伏立诺他。
[0021] 其中，所述混合溶剂为THF与DMF混合溶剂，优选地，THF与DMF体积比为1:0.2-0.5。
[0022] 其中，步骤(3)中的反应促进剂选自B-卤代邻苯二氧硼烷，例如B-氯代邻苯二氧硼烷，B-溴代邻苯二氧硼烷。
[0023] 优选地，对所得伏立诺他粗产物进一步纯化。
[0024] 优选地，在本发明的方法中，在步骤(3)中，以盐形式使用羟胺，最优选盐酸盐。
[0025] 优选地，相对于辛二酸，步骤(3)中使用的羟胺或其盐的摩尔用量为其1-3倍，优选为1:2-3。
[0026] 在本发明中，反应中所用溶剂的量并没有特别的限定，例如步骤(2)混合溶剂的使用量可以为辛二酸毫摩尔量的1-10倍体积( mL )，例如1 mmol辛二酸可以使用1-10ml混合溶剂。
[0027] 优选地，1 mmol辛二酸可以使用2-5 ml混合溶剂。
[0028] 在本发明的所述合成方法中，除非另有规定，自始至终，卤素或卤代中的卤素例如可为F、Cl、Br或I，优选为Cl、Br。
[0029] 具体地，在本发明的所述方法中，步骤(1)中制备辛二酸酐和偶联剂改性介孔二氧化硅的过程如下：
[0030] (a) 等摩尔的辛二酸酐与1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)在KH-550中0-5℃温度下搅拌反应5-10 min，减压抽滤，干燥固体物；
[0031] (b) 室温下将10-50 nm介孔二氧化硅颗粒分散于甲醇或乙醇中，调pH至9-10，制得介孔二氧化硅分散液；取一定量的上述固体分散于乙醇中，缓缓加入上述介孔二氧化硅分散液中，在25-30℃下搅拌反应4-8 h，反应结束后，离心分离，无水乙醇洗涤固形物1-2次，将其分散在甲醇-30-37wt%盐酸混合溶液体系中(甲醇：盐酸溶液体积比=3-5:1)，50-60℃下回流3-5 h；回流结束后离心分离，无水乙醇洗涤固体1-2次，真空干燥，得到辛二酸酐与EDC改性的亲水性介孔二氧化硅颗粒。
[0032] 在本发明的所述方法中，步骤(2)-步骤(4)一锅法具体制备过程如下：
[0033] 在THF/DMF混合溶剂中，25-30℃条件下用亲水性改性介孔二氧化硅预处理辛二酸1-3 h制备预处理液，其中辛二酸与改性介孔二氧化硅的用量比为1 mmol:0.5-1g，辛二酸与混合溶剂的用量比为1mmol:2-5ml；
[0034] 向预处理完毕的预处理混合液中加入羟胺盐酸盐以及B-卤代邻苯二氧硼烷，搅拌反应1-2 h，生成含有中间体N-羟基-7-羧基-庚酰胺的反应混合物，其中辛二酸与羟胺盐酸盐摩尔用量比为1:2-3，B-卤代邻苯二氧硼烷的摩尔用量为辛二酸的5-10%；调整混合液pH至10-12，加入苯胺反应2-3 h，从而制得伏立诺他混合液；
[0035] 反应液后处理：过滤除去固体及副产物，真空浓缩滤液，加入到二氯甲烷中并用水洗涤有机溶液，无水硫酸钠进行干燥；40℃真空蒸除有机溶剂，加入乙腈50℃下搅拌溶解3-5分钟，冷却析沉淀，抽滤，乙腈洗涤，将洗涤后的固体真空干燥，获得伏立诺他。
[0036] 其中，所述混合溶剂中THF与DMF体积用量比为1:0.2-0.5。
[0037] 优选地，在本发明的所述方法中，对所得伏立诺他进一步纯化，所述纯化步骤如下：
[0038] 在30℃下将粗伏立诺他加入饱和氨水/乙腈(氨水与乙腈体积比为1:5-10)混合溶液中，其中用量比例为1g:10-15ml；55-60℃下搅拌保温充分溶解，然后冷却至10-15℃析出沉淀，过滤，乙腈洗涤固体，真空干燥得精制产品。
[0039] 本发明所指的室温是指25℃±2℃，洗涤产品时，优选使用冷却溶剂，例如0-15℃，或0-10℃。
[0040] 在本发明中，可以采用本领域常规的方法对反应进行监测跟踪，例如TLC、LCMS、GCMS等，反应结束指TLC监测到不过量原料已消失或者LCMS、GCMS中不过量原料剩余小于2%。
[0041] 在本发明中，所采用的10-50 nm介孔二氧化硅来源并没有特别的限定，其可以是商购的介孔二氧化硅，也可以是按照本领域一般方法制备得到的。
[0042] 本发明使用的介孔二氧化硅在使用后，可以通过去除吸附物后再次改性的方法进行再生循环利用，进一步降低成本。除去吸附物的方法可以参考本领域常规方法进行。
[0043] 另外，在本发明的其他方面，提供了按照根据本发明上述方法制备的伏立诺他。
[0044] 本发明还提供了包含根据本发明制备的伏立诺他的药物组合物。优选地，所述药物组合物适合用于治疗癌症，优选皮肤癌，更优选皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)。
[0045] 综上，采用本发明提供的一锅法制备伏立诺他的方法，无需对中间体产物进行分离纯化，操作步骤更加简单，反应条件温和，选择性好，由于采用改性介孔二氧化硅作为偶联剂和催化剂，催化效果优异，反应的时间缩短，并提高了伏立诺他的收率和纯度。
