复合芽孢杆菌棉粕发酵剂及其制备方法   0    0

本发明公开了一种复合芽孢杆菌棉粕发酵剂及其制备方法，是以枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、侧胞芽孢杆菌、及凝结芽孢杆菌为菌种，利用液体发酵法进行扩大培养，然后接种到发酵罐中发酵，添加载体吸附，低温干燥，并按比例混合后制得，发酵剂中总菌数≥100×108CFU/g。本发明的棉粕发酵剂能有效地抑制棉粕发酵过程中杂菌的生长，降低棉粕中游离棉酚的含量，提高棉粕中蛋白质和游离氨基酸的含量，具有制备工艺简单，产品质量稳定可靠，成本低廉等特点。

1.一种复合芽孢杆菌棉粕发酵剂，其特征在于，所述发酵剂中含凝结
8
芽 孢 杆 菌 (Bacillus coagulans)3-5×10CFU/g、侧 胞 芽 孢 杆 菌 (Bacillus
8 8
lateraporus)25-35×10CFU/g、纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)30-40×10CFU/g、及枯草
8 8
芽孢杆菌(Bacillus subtilis)25-35×10CFU/g，总菌数≥100×10CFU/g。

2.一种制备如权利要求1所述复合芽孢杆菌棉粕发酵剂的方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：
(1)制备液体菌种：取枯草芽孢杆菌、侧胞芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、及凝结芽孢杆菌各1株分别接种一环斜面菌种细胞于液体菌种培养基中，在37℃-40℃，160-200r/min条件下，摇床振荡培养48-60h，使各种子液中的细胞芽孢形成率达90-95％，再于80℃恒温水浴处理10-15min，得到四种液体菌种；
(2)发酵：将上述各液体菌种按3-6％(V/V)的接种量分别接种于相应的发酵培养基中，在培养温度30-40℃，搅拌速度160-180r/min条件下培养48-72h；
(3)吸附干燥：按重量百分比取CaCO320-25％、及麸皮75-80％混匀作为载体，将上述各发酵液与载体分别按1mL∶1g的比例分别进行吸附，再分别于45-55℃烘干，烘干时间为
1.5-2.5h，至各单菌发酵剂的含水量分别为8-12％，得到各单菌发酵剂；
8
(4)取上述各单菌发酵剂按凝结芽孢杆菌3-5×10CFU/g、侧胞芽孢杆菌
8 8 8
25-35×10CFU/g、纳豆芽孢杆菌30-40×10CFU/g、及枯草芽孢杆菌25-35×10CFU/g的比
8
例混合均匀，得到复合芽孢杆菌棉粕发酵剂，且该棉粕发酵剂中总菌数≥100×10CFU/g。

3.如权利要求2所述的复合芽孢杆菌棉粕发酵剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的液体菌种培养基组成为每升水中加入有30-40g葡萄糖、10-15g豆饼粉、
2-6g(NH4)2SO4、2-4g KH2PO4、1-2.5g MgSO4·7H2O、3-5gNaCl、及2-4gCaCO3，初始pH值为
7.2-7.5。

4.如权利要求2所述的复合芽孢杆菌棉粕发酵剂的制备方法，其特征在于：所述凝结芽孢杆菌的发酵培养基组成为每升水中加入有15-25g麸皮、7-10g豆饼粉、5-10g玉米浆、
2-4g KH2PO4、1-2.5g MgSO4·7H2O、0.1-0.3g MnSO4·H2O、及3-5gCaCO3，初始pH值为7.2-7.5。

5.如权利要求2所述的复合芽孢杆菌棉粕发酵剂的制备方法，其特征在于：所述侧胞芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌的发酵培养基组成为每升水中加入有25-35g葡萄糖、10-20g豆饼粉、4-6g鱼粉、2-4g KH2PO4、1-2g MgSO4·7H2O、0.1-0.5gMnSO4·H2O、及3-5gCaCO3，初始pH值为7.2-7.5。

6.如权利要求2所述的复合芽孢杆菌棉粕发酵剂的制备方法，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌的发酵培养基组成为每升水中加入有30-40g葡萄糖、4-6g(NH4)2SO4、6-10g麸皮、
2-4g KH2PO4、1-2.5g MgSO4·7H2O、1-2.5g MnSO4·H2O、0.1-0.5g FeSO4·7H2O、及3-5gCaCO3，初始pH值为7.2-7.5。