[0034] 下面结合具体实施例对本发明所述技术方案作进一步的说明。
[0035] 实施例1抗敏祛痘系列化妆品的制备
[0036] 第一步：各种精油的制备
[0037] 碰碰香精油的制备方法：
[0038] 取碰碰香鲜叶，切分成小块，置于萃取罐中的物料篮内，然后打开压力泵将去离子水以20mL/min的速度输送到初始温度为100℃的预加热器中，以2℃/min连续程序升温加热到150℃，然后将热去离子水以20mL/min输送到萃取罐中；在压力5MPa和温度150℃下，提取15min，提取液由提取罐的底部流入冷却器中进行冷却，冷却至常温，加入0.1gNaCl，继续使用石油醚进行液一液萃取，静置后分离有机层用无水硫酸钠干燥，然后使用旋转蒸发器在真空状态下除去有机溶剂，即得碰碰香精油。
[0039] 水芹精油的制备方法：
[0040] 取水芹鲜茎叶，干燥，粉碎，过筛，放入超临界CO2萃取釜中，夹带剂乙醇用量固液比为1.5mL/mg萃取，萃取条件为：萃取压力45MPa、萃取温度50℃、萃取时间3.5h、CO2流速25kg/h。萃取液过滤，用旋转蒸发仪回收乙醇并挥干，即得水芹精油。
[0041] 矮地茶精油的制备方法：
[0042] 取矮地茶全株，粉碎，过筛，置圆底烧瓶中，加入20倍量蒸馏水，用盐酸调节pH至5.0后向容器中加入0.5％的复合酶(纤维素酶与果胶酶按2：1混合)，置于水浴锅内45℃恒温酶解35min，转入微波动态萃取设备料桶中，设置微波功率为850W，微波辐射40min，在微波萃取设备上接挥发油分离器，收集蒸馏出的精油，即得矮地茶精油。
[0043] 第二步：复配精油纳米囊的制备
[0044] 取明胶1g，加入10mL水泡发过夜，放入水浴锅中溶解，再加入23mL水制备明胶溶液，调节pH为8；称取2g海藻酸钠，加入33mL水溶解，再加入1mL复配精油，研磨成初乳；在1000r/min高速分散条件下加入明胶溶液，不断搅拌将其混匀，调pH至4，持续搅拌10min，倒入60mL体积的冷水继续搅拌，降温至30℃；再加冰降温至10℃以下；继续搅拌加入37％的甲醛2mL进行固化，持续搅拌60min，停止搅拌，放置，沉淀完全，倾去上层清液，然后把沉淀的固体加无入水乙醇抽至半干，反复操作5次。最后将固体烘干直到重量不变，收集固体，即得复配精油纳米囊。
[0045] 第三步：将复配精油纳米囊添加到日用化妆品制备成抗敏祛痘保湿水、抗敏祛痘乳、抗敏祛痘霜。
[0046] 本发明提供一种所述复配精油纳米囊在抗敏祛痘化妆品中的应用，优选所述复配精油纳米囊在抗敏祛痘化妆品中质量添加量为15‑20％。
[0047] 所述抗敏祛痘化妆品，在剂型和基质选择上没有特别限制，可制成抗敏祛痘保湿水、抗敏祛痘乳和抗敏祛痘面霜等。
[0048] 抗敏祛痘保湿水的制备：
[0049] 抗敏祛痘保湿水的原料组分及含量如表1所示。
[0050] 表1抗敏祛痘保湿水配方
[0051]
[0052] 制备工艺：
[0053] 将复配精油纳米囊加入到中分子透明质酸中，再将中分子透明质酸混合物和高分子透明质酸混合均匀得到混合物料A；再将混合物料A和其余各组分加入去离子水中，混合均匀，即得抗敏祛痘保湿水。
[0054] 抗敏祛痘乳液的制备：
[0055] 抗敏祛痘乳液的原料组分及含量如表2所示。
[0056] 表2抗敏祛痘乳液配方
[0057]
[0058] 制备工艺：
[0059] 将橄榄油、维生素E醋酸酯、尼泊金丙酯、聚乙二醇(6)鲸蜡硬脂、单硬脂酸甘油酯、十六醇作为油相，加热至55℃搅拌至均匀，保温25min，备用；将甘油、氨基酸、维生素B2、十六醇、去离子水作为水相，加热至55℃搅拌至均匀，保温25min，备用；将油相加入到乳化锅中，温度维持在55℃，开启匀质搅拌，搅拌速度控制在25r/min，再将水相抽入乳化锅中，匀质5min后，再搅拌20min；降温至35℃，加入复配精油纳米囊，搅拌混合均匀，冷却至室温，即得抗敏祛痘乳液。
[0060] 抗敏祛痘面霜的制备：
[0061] 抗敏祛痘面霜的原料组分及含量如表3所示。
[0062] 表3抗敏祛痘面霜配方
[0063]
[0064] 制备工艺：
[0065] 将透明质酸钠和纳米囊混合均匀，得到混合物料A；将医用凡士林与甘油置于水浴锅上加热至75℃相溶，得到混合物料B；待混合物料B的温度下降至38℃时，加入氨基酸、乳酸钠、黄酮、聚丙烯酰胺、维生素B2、维生素E和混合物料A，搅拌均匀，加入去离子水，调节pH值至5.5‑6，即得抗敏祛痘面霜。
[0066] 以下通过试验例进一步阐述本发明所述复配精油具有抗敏、抑菌和抑制黑色素沉着功效，可用于制备抗敏祛痘系列化妆品。
[0067] 试验例1
[0068] 本发明复配精油的体外抗敏活性研究：
[0069] 1.材料与方法
[0070] 1.1试验材料
[0071] 按上述实施方案分别制备碰碰香精油，水芹精油，矮地茶精油。按组方比例制成碰碰香精油和水芹精油的复配精油(组合物1，矮地茶精油用等比例的花生油代替)；水芹精油和矮地茶精油的复配精油(组合物2，碰碰香精油用等比例的花生油代替)；碰碰香精油和矮地茶精油的复配精油(组合物3，水芹精油用等比例的花生油代替)；本发明复配精油(组合物4)；本发明复配精油纳米囊(组合物4制备的纳米囊)。
[0072] 1.2试验方法
[0073] (1)将25％DMSO和500U/mL透明质酸酶加入到0.1mol/L乙酸盐缓冲液中，再加入浓度不同的复配精油0.25mL、复配精油纳米囊1g和2.5mmol/L的CaCl2，在37℃下孵育20min。
[0074] (2)20min后，加入透明质酸(1.2mg/mL，5mL)，混合物在37℃孵育40min。然后加入0.4mol/L NaOH1mL并在冰上冷却来停止反应。
[0075] (3)10min后，加入800mM硼酸钠缓冲液3mL，将混合物在100℃下保温3min，并在冰上冷却。加入15mL显色剂(1g对二甲基苯甲醛溶于100mL含1.25mL浓盐酸的乙酸溶液)。然后将混合物在37℃温育20min。在540nm测定吸光度，根据下式计算透明质酸酶抑制活性(％)。
[0076]
[0077] 式中：A：对照溶液OD值；B：对照空白溶液(酶钝化、蒸馏水代替样品)OD值；C：试样溶液的OD值；D：不加试样的OD值。
[0078] 2.结果与分析
[0079] 各组合物对透明质酸的抑制率见表4。
[0080] 表4各组合物的透明质酸抑制率试验结果
[0081]
[0082] 与组合物1比较，*P<0.01；与组合物2比较，#P<0.01；与组合物3比较，△P<0.01；与▲组合物4比较，P<0.01。
[0083] 从表4可以得到，各组合物均有抗敏作用，且组合物5的抗敏活性最高。分别与组合物1、组合物2、组合物3比较，组合物4的抗敏活性均显著升高，说明3种天然植物精油组合，抗敏活性升高，缺少任何一种都会使其活性下降。由组合物4制备成纳米囊，其透明质酸抑制率较组合物4也有显著升高，因为组合物1‑4中的精油易挥发，作用时间短，而制成纳米囊可以克服这一缺点，使其抗敏活性提高。
[0084] 3.结论：本发明复配精油及其纳米囊有较高的透明质酸抑制率，显示出高抗敏活性，起到快速抗敏，维稳受损皮肤的作用。
[0085] 试验例2
[0086] 本发明复配精油对葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的体外抑制活性：
[0087] 1.材料与方法
[0088] 1.1试验材料
[0089] 各组合物的制备方法同试验例1。
[0090] 1.2试验方法
[0091] (1)菌种液的制备：取葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌2个菌株，分别在肉汤琼脂斜面37℃下培养约24h后，经震荡、搅匀作为菌种液。
[0092] (2)含菌培养基平皿的制备：将经过高压蒸汽灭菌后的BS培养基冷却到45～50℃5 6
时，分别加入10‑10CFU/mL的葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌，充分震荡混合均匀，倒入灭菌后的培养皿中，放冷后，即得含菌培养基平板。
[0093] (3)抑菌圈的测量：待含有葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的BS培养基凝固后，用直径7mm的打孔器打孔，每个培养皿可以打四个孔，每一个孔加20μL复配精油和80μg的复配精油纳米囊置于37℃的培养箱中培养24h后，测量抑菌圈直径。每个组合物测试10次，计算均值和标准差。
[0094] 2.结果与分析
[0095] 各组合物对葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的抑菌活性见表5。
[0096] 表5各组合物对葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的抑菌试验结果
[0097]
[0098] 与组合物1比较，*P<0.01；与组合物2比较，#P<0.01；与组合物3比较，△P<0.01；与▲组合物4比较，P<0.01。
[0099] 从表5可以得到，各组合物均对葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌有抑制作用，且组合物5抑菌作用最好。分别与组合物1、组合物2、组合物3比较，组合物4的抑菌活性均显著升高，说明3种天然植物精油组合，抑菌活性升高，缺少任何一种都会使其活性下降。组合物1‑4由于精油易挥发，不能起到最好的抑菌效果，将复配精油制备成纳米囊，减少精油的发挥，可持久稳定地发挥抑菌作用。
[0100] 3.结论：本发明复配精油纳米囊能有效抑制葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌，从而达到持久祛痘的效果。
[0101] 试验例3
[0102] 本发明复配精油对黑色素沉着的抑制作用：
[0103] 1.材料与方法
[0104] 1.1试验材料
[0105] 各组合物的制备方法同试验例1。
[0106] 1.2试验方法
[0107] (1)B16细胞的培养：B16细胞在湿度为95％、CO2浓度为5％的空气中，在37℃的环境下进行培养，培养液为10％FBS的DMEM。
[0108] (2)黑色素含量的测定：B16细胞以每孔5×104个的密度接种在24孔板上培养24h后，待细胞完全贴壁后，弃去上层的培养基，加入各组合物含药培养500μL，设定正常组和阳性对照组，继续培养48h后，弃去上清液，使用PBS清洗5次，后使用胰蛋白酶消化处理细胞，再收集细胞到离心管中，以10000r/min离心10min，弃去上清液，后用10％DMSO的2mol/L的NaOH 150μL溶解黑色素，并于80℃水浴中保温2h，最后吸取溶解液100μL转移到96孔板中，通过每孔上清液在405nm波长下的吸收度，测定黑色素的含量用相对于空白对照吸收度的百分比表示，含量的百分比越小，证明样品对黑色素沉着的抑制作用越强。
[0109] 2.结果与分析
[0110] 各组合物对黑色素沉着的抑制作用见表6。
[0111] 表6各组合物对黑色素沉着的抑制作用
[0112]
[0113] 与组合物1比较，*P<0.01；与组合物2比较，#P<0.01；与组合物3比较，△P<0.01；与▲组合物4比较，P<0.01。
[0114] 从表6可以得到，各组合物均对黑色素的沉着有抑制作用，且5号抑制沉着效果最好。分别与组合物1、组合物2、组合物3比较，组合物4的黑色素含量最低，说明3种天然植物精油组合，黑色素含量显著降低，缺少任何一种都会使其抑制作用减弱。组合物1‑4由于精油易挥发，导致黑色素含量比组合物5高，将复配精油制备成纳米囊，减少精油的挥发，可以稳定持久地发挥复配精油活性成分对黑色素沉着的抑制作用。
