[0018] 1)诱导培养:在云南金叶子茎上取顶芽或腋芽在流水下清洗干净,在流水下清洗干净,利用75%乙醇浸泡30秒,浓度为1%的升汞消毒15分钟,无菌水清洗5遍,利用手术刀切去边缘部分,接种于诱导培养基中,培养温度为29℃,光照强度为2100lux,光照时间为14小时/天,培养16天后可见云南金叶子小芽发出,其中培养基为:N68为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)0.3mg/L,萘乙酸(NAA)0.02mg/L,赤霉素(GA)2.0mg/L,糖30g/L,琼脂4.0g/L,香蕉25g,土豆泥25g,椰子汁25g,茶多酚15g,PH值为5.8;
[0019] 2)继代培养:将步骤1)获得的大量的云南金叶子小芽置于1/2MS为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)0.5mg/L,萘乙酸(NAA)2.0mg/L,糖30g/L,琼脂4.0g/L,香蕉25g,土豆泥25g,椰子汁25g,茶多酚15g,PH值为5.8的培养基中培养,培养温度为29℃,培养时间为14小时/天,光照强度为2100lux,44天左右可获得2cm左右高度的整齐的云南金叶子组培分化苗;
[0020] 3)云南金叶子分化苗生根培养,将步骤2)获得的大量的云南金叶子分化苗移栽到生根培养基,培养温度为29℃,,光照强度2500lux,光照时间为14小时/天的条件下培养40天后,把组培苗移到自然光下培养,50天后可得到具有4条根的云南金叶子生根组培苗,其中生根培养基为:1/2MS为基本培养基4%,香蕉20%,土豆20%,椰子汁20%,茶多酚5%,生长素IBA0.1%,糖2%,活性炭0.2%,PH值为5.8;
[0021] 4)炼苗与移栽:清洗掉步骤3)中得到的云南金叶子生根组培苗根部的培养基,晾干水汽,将云南金叶子生根组培苗带根的完整植株移栽到带基质的苗床上,待2个月后云南金叶子小苗生长稳定,长出新的根和芽就可移栽到种植大棚中,大棚栽培时要适当遮阴,光照强度为3200lux,湿度控制在60%,温度控制在20℃。
[0022] 实施例2
[0023] 1)诱导培养:在云南金叶子茎上取顶芽或腋芽在流水下清洗干净,在流水下清洗干净,利用80%乙醇浸泡40秒,浓度为1.2%的升汞消毒15分钟,无菌水清洗6遍,利用手术刀切去边缘部分,接种于诱导培养基中,培养温度为30℃,光照强度为2200lux,光照时间为16小时/天,培养20天后可见云南金叶子小芽发出,其中培养基为N68为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)0.35mg/L,萘乙酸(NAA)0.03mg/L,赤霉素(GA)1.5mg/L,糖28g/L,土豆泥25g,椰子汁25g,茶多酚15g,琼脂3.8g/L,PH值为5.8;
[0024] 2)继代培养:将步骤1)获得的大量的云南金叶子小芽置于1/2MS为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)4.0mg/L,萘乙酸(NAA)2.0mg/L,糖30g/L,琼脂4.0g/L,土豆泥25g,椰子汁25g,茶多酚15g,PH值为5.8的培养基中培养,培养温度为30℃,培养时间为16小时/天,光照强度为2200lux,70天左右可获得2cm左右高度的整齐的云南金叶子组培分化苗;
[0025] 3)云南金叶子分化苗生根培养,将步骤2)获得的大量的云南金叶子分化苗移栽到生根培养基,培养温度为30℃,,光照强度2500lux,光照时间为16小时/天的条件下培养35天后,把组培苗移到自然光下培养,65天后可得到具有4条根的云南金叶子生根组培苗,其中生根培养基为:1/2MS为基本培养基4%,土豆20%g,椰子汁20%,茶多酚5%g,生长素IBA 2.0%,糖2%,活性炭0.2%,PH值为5.8;
[0026] 4)炼苗与移栽:清洗掉步骤3)中得到的云南金叶子生根组培苗根部的培养基,晾干水汽,将云南金叶子生根组培苗带根的完整植株移栽到带基质的苗床上,待2个月后云南金叶子小苗生长稳定,长出新的根和芽就可移栽到种植大棚中,大棚栽培时要适当遮阴,光照强度为3200lux,湿度控制在60%,温度控制在20℃。
[0027] 实施例3
[0028] 1)诱导培养:在云南金叶子茎上取顶芽或腋芽在流水下清洗干净,在流水下清洗干净,利用75%乙醇浸泡35秒,浓度为1.2%的升汞消毒15分钟,无菌水清洗6遍,利用手术刀切去边缘部分,接种于诱导培养基中,培养温度为32℃,光照强度为2300lux,光照时间为16小时/天,培养20天后可见云南金叶子小芽发出,其中培养基为:N68为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)0.012:,萘乙酸(NAA)0.015,赤霉素(GA)1.0mg/L,糖28g/L,琼脂3.8g/L,香蕉20%,椰子汁20%,茶多酚5%,PH值为5.8;
[0029] 2)继代培养:将步骤1)获得的大量的云南金叶子小芽置于1/2MS为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)4.0mg/L,萘乙酸(NAA)2.0mg/L,糖30g/L,琼脂4.0g/L,香蕉20%,椰子汁20%,茶多酚5%,PH值为5.8的培养基中培养,培养温度为30℃,培养时间为16小时/天,光照强度为2200lux,55天左右可获得2cm左右高度的整齐的云南金叶子组培分化苗;
[0030] 3)云南金叶子分化苗生根培养,将步骤2)获得的大量的云南金叶子分化苗移栽到生根培养基,培养温度为30℃,,光照强度2500lux,光照时间为16小时/天的条件下培养35天后,把组培苗移到自然光下培养,60天后可得到具有4条根的云南金叶子生根组培苗,其中生根培养基为:1/2MS为基本培养基4%,香蕉20%,椰子汁20%,茶多酚5%,生长素IBA 2.0%,糖2%,活性炭0.2%,,PH值为5.8;
[0031] 4)炼苗与移栽:清洗掉步骤3)中得到的云南金叶子生根组培苗根部的培养基,晾干水汽,将云南金叶子生根组培苗带根的完整植株移栽到带基质的苗床上,待2个月后云南金叶子小苗生长稳定,长出新的根和芽就可移栽到种植大棚中,大棚栽培时要适当遮阴,光照强度为3200lux,湿度控制在60%,温度控制在20℃。
[0032] 实施例4
[0033] 1)诱导培养:在云南金叶子茎上取顶芽或腋芽在流水下清洗干净,在流水下清洗干净,利用75%乙醇浸泡35秒,浓度为1.2%的升汞消毒15分钟,无菌水清洗6遍,利用手术刀切去边缘部分,接种于诱导培养基中,培养温度为32℃,光照强度为2300lux,光照时间为16小时/天,培养20天后可见云南金叶子小芽发出,其中培养基为:N68为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip):萘乙酸(NAA):赤霉素(GA)1.5mg/L,,糖28g/L,琼脂3.Sg/L,香蕉25g,土豆泥25g,茶多酚15g,PH值为5.8;
[0034] 2)继代培养:将步骤1)获得的大量的云南金叶子小芽置于1/2MS为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)4.0mg/L,萘乙酸(NAA)2.0mg/L,糖30g/L,琼脂4.0g/L,香蕉25g,土豆泥25g,茶多酚15g,PH值为5.8的培养基中培养,培养温度为30℃,培养时间为16小时/天,光照强度为2200lux,60天左右可获得2cm左右高度的整齐的云南金叶子组培分化苗;
[0035] 3)云南金叶子分化苗生根培养,将步骤2)获得的大量的云南金叶子分化苗移栽到生根培养基,培养温度为30℃,,光照强度2500lux,光照时间为16小时/天的条件下培养35天后,把组培苗移到自然光下培养,45天后可得到具有4条根的云南金叶子生根组培苗,其中生根培养基为:1/2MS为基本培养基4%,香蕉20%,土豆20%,茶多酚5%,生长素IBA 2.0%,糖2%,活性炭0.2%,PH值为5.8;
[0036] 4)炼苗与移栽:清洗掉步骤3)中得到的云南金叶子生根组培苗根部的培养基,晾干水汽,将云南金叶子生根组培苗带根的完整植株移栽到带基质的苗床上,待2个月后云南金叶子小苗生长稳定,长出新的根和芽就可移栽到种植大棚中,大棚栽培时要适当遮阴,光照强度为3200lux,湿度控制在60%,温度控制在20℃。
[0037] 实施例5
[0038] 1)诱导培养:在云南金叶子茎上取顶芽或腋芽在流水下清洗干净,在流水下清洗干净,利用75%乙醇浸泡35秒,浓度为1.2%的升汞消毒15分钟,无菌水清洗6遍,利用手术刀切去边缘部分,接种于诱导培养基中,培养温度为32℃,光照强度为2300lux,光照时间为16小时/天,培养30天后可见云南金叶子小芽发出,其中培养基为:N68为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)0.35,萘乙酸(NAA,0.3:赤霉素(GA)3mg/L,香蕉25g,土豆泥25g,椰子汁25g,糖28g/L,琼脂3.8g/L,PH值为5.8;
[0039] 2)继代培养:将步骤1)获得的大量的云南金叶子小芽置于1/2MS为基本培养基附加异戊烯基腺嘌呤(2-ip)4.0mg/L,萘乙酸(NAA)2.0mg/L,糖30g/L,琼脂4.0g/L,香蕉25g,土豆泥25g,椰子汁25g,PH值为5.8的培养基中培养,培养温度为30℃,培养时间为16小时/天,光照强度为2200lux,70天左右可获得2cm左右高度的整齐的云南金叶子组培分化苗;
[0040] 3)云南金叶子分化苗生根培养,将步骤2)获得的大量的云南金叶子分化苗移栽到生根培养基,培养温度为30℃,光照强度2500lux,光照时间为16小时/天的条件下培养65天后,把组培苗移到自然光下培养,75天后可得到具有4条根的云南金叶子生根组培苗,其中生根培养基为:1/2MS为基本培养基4%,生长素IBA 2.0%,糖2%,活性炭0.2%,香蕉20%,土豆20%,椰子汁20%,PH值为5.8;
[0041] 4)炼苗与移栽:清洗掉步骤3)中得到的云南金叶子生根组培苗根部的培养基,晾干水汽,将云南金叶子生根组培苗带根的完整植株移栽到带基质的苗床上,待2个月后云南金叶子小苗生长稳定,长出新的根和芽就可移栽到种植大棚中,大棚栽培时要适当遮阴,光照强度为3200lux,湿度控制在60%,温度控制在20℃。
[0042] 实施例1-实施例5的组培方法试验数据对比
[0043]序号 出苗时间/天 发芽率 继代成苗率 生根率 炼苗成活率
实施例1 210 96% 94% 97% 98%
实施例2 250 85% 80% 80% 83%
实施例3 230 89% 82% 84% 86%
实施例4 220 90% 85% 86% 90%
实施例5 300 70% 72% 71% 70%
[0044] 尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。