[0017] 下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
[0018] 实施例1：
[0019] 一种传递5-氟尿嘧啶微球的制备方法，包括以下步骤：
[0020] 1）海藻酸钠微球的制备：在持续高速搅拌下，将10份海藻酸钠缓慢加入到60份2.0%的span80异辛烷溶液中，加入0.08份3-甲氧基苯乙酮，10分钟后滴加2份4.0%的吐温-
80水溶液，继续乳化5分钟后，滴加1.0份0.5g/mL的CaCl2水溶液，交联凝胶化形成海藻酸钠微球，搅拌固化10分钟后，加入8份无水乙醇分离微球；静置一段时间后离心分离微球，用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠微球；该制备工艺条件下，微球的分散性和球形度较好，表面光滑，圆整均匀，微球粒径范围较窄，多为30-80μm；
[0021] 2）将0.045份5-氟尿嘧啶溶于30份壳聚糖醋酸水溶液中，在搅拌条件下加入0.5份海藻酸钠核心微球，400r/min高速搅拌10分钟，5000r/min转速下离心3分钟，用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠-壳聚糖微球；以5-氟尿嘧啶作为模型活性成分被封装到海藻酸盐微球中，形成一个海藻酸钠-Ca2+复合体，为进一步的包覆做准备；
[0022] 3）取0.5份卡拉胶以3份乙醇浸润，加入30份蒸馏水充分搅拌溶解，得轻微粘性、轻微乳白色的卡拉胶溶液，在搅拌条件下，将海藻酸钠-壳聚糖微球加入卡拉胶溶液中，400r/min高速搅拌10分钟，5000r/min转速下离心5分钟，然后用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶三重包覆载物微球。
[0023] 实施例2：
[0024] 一种传递5-氟尿嘧啶微球的制备方法，包括以下步骤：
[0025] 1）丁二酸酐改性：称取壳聚糖2.2份置于容器中，加入160份蒸馏水，在室温下搅拌30-45分钟使其充分溶胀；称取0.55份丁二酸酐和0.5份碳酸钠，混合均匀为四份，每隔30分钟往三口容器中加入一份，随后反应3小时；将反应液以1.2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至
10，离心除去未反应的壳聚糖，上清液用蒸馏水透析36小时，最后真空冷冻干燥得到白色产物丁二酰化壳聚糖；
[0026] 2）海藻酸钠微球的制备：在持续高速搅拌下，将12份海藻酸钠缓慢加入到65份2.2%的span80异辛烷溶液中，20分钟后滴加2.5份4.5%的吐温-80水溶液，继续乳化8分钟后，滴加1.2份0.6g/mL的CaCl2水溶液，交联凝胶化形成海藻酸钠微球，搅拌固化15分钟后，加入10份无水乙醇分离微球；静置一段时间后离心分离微球，用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠微球；该制备工艺条件下，微球的分散性和球形度较好，表面光滑，圆整均匀，微球粒径范围较窄，多为30-80μm；
[0027] 3）海藻酸钠-壳聚糖微球的制备：将0.050份5-氟尿嘧啶溶于40份壳聚糖醋酸水溶液中，在搅拌条件下加入0.55份海藻酸钠核心微球，500r/min高速搅拌15分钟，6000r/min转速下离心5分钟，用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠-壳聚糖微球；以5-氟尿嘧啶作为模型活性成分被封装到海藻酸盐微球中，形成一个海藻酸钠-Ca2+复合体，为进一步的包覆做准备；
[0028] 4）海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球的制备：取0.6份卡拉胶以5份乙醇浸润，加入40份蒸馏水充分搅拌溶解，得轻微粘性、轻微乳白色的卡拉胶溶液，在搅拌条件下，将海藻酸钠-壳聚糖微球加入卡拉胶溶液中，500r/min高速搅拌15分钟，6000r/min转速下离心8分钟，然后用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶三重包覆载物微球；为了克服海藻酸盐微球多孔性和释放活性成分时出现爆破释放等缺点，采用正负离子相互作用，羧基与氨基，磺酸基与氨基形成聚合电解质的机理，在海藻酸钠微球表面包裹两层多糖层，形成LBL结构，制备得到的核壳式多层微球表面空隙减少，有效增加了活性成分释放速度，并且活性成分能够经过酸性胃液，到达结肠，达到一定的靶向治疗效果。
[0029] 实施例3：
[0030] 一种传递5-氟尿嘧啶微球的制备方法，包括：丁二酸酐改性、海藻酸钠微球的制备、海藻酸钠-壳聚糖微球的制备、海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球的制备，具体包括以下步骤：
[0031] 丁二酸酐改性：称取壳聚糖2.0份置于容器中，加入160份蒸馏水，在室温下搅拌30分钟使其充分溶胀；称取0.5份丁二酸酐和0.5份碳酸钠，混合均匀为四份，每隔30分钟往三口容器中加入一份，随后反应2.5小时；将反应液以1.2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至9.8，离心除去未反应的壳聚糖，上清液用蒸馏水透析36小时，最后真空冷冻干燥得到白色产物丁二酰化壳聚糖；通过丁二酸酐锈蚀壳聚糖使其含有羧基基团，不仅可以提高壳聚糖在中性和碱性水溶液中的溶解性，而且会使壳聚糖带有负电荷，表面带有负电荷的凝胶微球可以有效的避免其在血液中的聚集，使其具有更长的血液循环，进而增强活性载物在患病组织的积累；
[0032] 海藻酸钠微球的制备：在持续高速搅拌下，将12份海藻酸钠缓慢加入到60份2.0%的span80异辛烷溶液中，加入0.08份3-甲氧基苯乙酮、0.02份D-（+）-麻黄碱、0.06份D-（-）-麻黄碱，15分钟后滴加2.4份4.2%的吐温-80水溶液，继续乳化6分钟后，滴加1.0份0.6g/mL的CaCl2水溶液，交联凝胶化形成海藻酸钠微球，搅拌固化15分钟后，加入10份无水乙醇分离微球；静置一段时间后离心分离微球，用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠微球；该制备工艺条件下，微球的分散性和球形度较好，表面光滑，圆整均匀，微球粒径范围较窄，多为30-80μm；添加了适量的成孔剂，可以在微球内部及表面形成孔洞结构，有利于溶剂分子更快的进入微球中，提高了溶胀响应效率；
[0033] 海藻酸钠-壳聚糖微球的制备：将0.050份5-氟尿嘧啶溶于40份壳聚糖醋酸水溶液中，在搅拌条件下加入0.6份海藻酸钠核心微球，400r/min高速搅拌15分钟，5000r/min转速下离心5分钟，用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠-壳聚糖微球；以5-氟尿嘧啶作为模型活性成分被封装到海藻酸盐微球中，形成一个海藻酸钠-Ca2+复合体，为进一步的包覆做准备；微球外壁是由海藻酸钠与壳聚糖反应得到的具有高强度的网状结构，且各层之间由于正负电荷吸引的作用，具有较大的分子链堆积密度，核心的活性成分向外释放速率较慢，释放时间较长；
[0034] 海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球的制备：取0.6份卡拉胶以5份乙醇浸润，加入35份蒸馏水充分搅拌溶解，得轻微粘性、轻微乳白色的卡拉胶溶液，在搅拌条件下，将海藻酸钠-壳聚糖微球加入卡拉胶溶液中，400r/min高速搅拌10分钟，6000r/min转速下离心6分钟，然后用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶三重包覆载物微球；为了克服海藻酸盐微球多孔性和释放活性成分时出现爆破释放等缺点，采用正负离子相互作用，羧基与氨基，磺酸基与氨基形成聚合电解质的机理，在海藻酸钠微球表面包裹两层多糖层，形成LBL结构，制备得到的核壳式多层微球表面空隙减少，有效增加了活性成分释放速度，并且活性成分能够经过酸性胃液，到达结肠，达到一定的靶向治疗效果。
[0035] 将一定质量m0的干态海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球放入不同pH值的盐酸溶液与磷酸盐缓冲溶液中，隔一段时间后取出擦干表面水分后称重m，则定义溶胀比SR用下式表示： 。
[0036] 将实施例1-3中的干态海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球分别置于pH=1.4（胃液环境）、pH=6.8（细胞外液环境）与pH=7.4（肠液环境），测量其30分钟时的溶胀比SR如表1所示：
[0037] 表1.浸泡30分钟时的干态海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球的溶胀比
[0038]浸泡环境 实施例1 实施例2 实施例3
pH=1.4的SR 2.5 1.5 1.3
pH=6.8的SR 4.6 1.8 1.5
pH=7.4的SR 17.5 20.1 23.4
[0039] 由表1可以看出，海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球在pH=1.2（模拟胃液环境）与pH=6.7（去离子水环境）环境下的溶胀比均较低，微球体系在胃液环境中具有较好的稳定性，可以有效的保证微球中的活性成分不会溶出；同时当海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球处于pH=
7.4的结肠液环境下，则具有较高的溶胀比，微球体系溶胀后，内部包覆的活性成分被释放出来发挥功效，具有较高的靶向释放特性，同时海藻酸钠、壳聚糖、卡拉胶也可以被人体吸收降解，完全无毒副物质残留；特别地，在实施例1中，没有对壳聚糖进行改性操作，导致体系LBL结构的牢固强度降低，使其在低pH值环境下也发生了一定程度的溶胀，导致其包覆活性成分的外泄；在实施例2中，海藻酸钠微球的制备步骤中没有添加成孔剂，导致微球体系在30分钟时的溶胀比相对较低，会影响微球核包覆活性成分的释放，降低其释放速度。因此在实施例3中，对壳聚糖进行丁二酸酐改性有利于增强壳聚糖的极性，进而增强羧基与氨基、磺酸基与氨基的相互作用，增强微球体系的强度，增强海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球体系的靶向特性；在制备海藻酸钠微球的步骤中加入了3-甲氧基苯乙酮作为成孔剂，同时加入了D-（+）-麻黄碱、D-（-）-麻黄碱的混合物，麻黄碱与3-甲氧基苯乙酮产生协同作用，可以使海藻酸钠-壳聚糖-卡拉胶微球体系在特定的靶向环境（pH=7.35-7.5）下具有较高的溶胀比与较快的溶胀速度，进一步提高活性成分靶向释放的精准度与时效性，具有较好的应用前景。
[0040] 本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
[0041] 以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
