[0019] 为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
[0020] 本发明实施例所用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0021] 本发明实施例所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0022] 实施例1
[0023] 一种用于山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0024] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0025] S2、杀青：将山茶籽粉加入到70℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:4；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为6000rpm，45℃、30MPa，循环1次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱5份、海藻酸1份、聚氧乙烯蓖麻油3份；
[0026] S3、酶解：将质量比1:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为50000u/g，碱性蛋白酶活力为30000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.2％，调节pH值6.8，酶解温度30℃，酶解时间3h，得到酶解液；
[0027] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照2:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:5，升温至70℃，水浴回流4h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.3mm，厚度为0.2mm，截留分子量为6000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0028] 实施例2
[0029] 一种用于山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0030] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0031] S2、杀青：将山茶籽粉加入到90℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:15；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为20000rpm，65℃、150MPa，循环3次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱8份、海藻酸3份、聚氧乙烯蓖麻油5份；
[0032] S3、酶解：将质量比3:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为100000u/g，碱性蛋白酶活力为80000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.5％，调节pH值7.2，酶解温度50℃，酶解时间5h，得到酶解液；
[0033] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照4:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:8，升温至80℃，水浴回流8h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.5mm，厚度为0.2mm，截留分子量为8000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0034] 实施例3
[0035] 一种用于山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0036] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0037] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为13000rpm，55℃、90MPa，循环2次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱7份、海藻酸2份、聚氧乙烯蓖麻油4份；
[0038] S3、酶解：将质量比2:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为80000u/g，碱性蛋白酶活力为50000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.4％，调节pH值7.0，酶解温度40℃，酶解时间4h，得到酶解液；
[0039] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照3:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.4mm，厚度为0.2mm，截留分子量为7000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0040] 实施例4
[0041] 一种用于山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0042] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0043] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为13000rpm，55℃、90MPa，循环2次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱5份、海藻酸1份、聚氧乙烯蓖麻油3份；
[0044] S3、酶解：将质量比2:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为80000u/g，碱性蛋白酶活力为50000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.4％，调节pH值7.0，酶解温度40℃，酶解时间4h，得到酶解液；
[0045] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照2:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.4mm，厚度为0.2mm，截留分子量为7000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0046] 实施例5
[0047] 一种用于山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0048] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0049] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为13000rpm，55℃、90MPa，循环2次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱8份、海藻酸3份、聚氧乙烯蓖麻油5份；
[0050] S3、酶解：将质量比2:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为80000u/g，碱性蛋白酶活力为50000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.4％，调节pH值7.0，酶解温度40℃，酶解时间4h，得到酶解液；
[0051] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照4:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.4mm，厚度为0.2mm，截留分子量为7000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0052] 对比例1
[0053] 本对比例与实施例3的区别在于，所述S2中将山茶籽粉加入到70～90℃水中杀青。
[0054] 山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0055] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0056] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为13000rpm，55℃、90MPa，循环2次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱7份、海藻酸2份、聚氧乙烯蓖麻油4份；
[0057] S3、酶解：将质量比2:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为80000u/g，碱性蛋白酶活力为50000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.4％，调节pH值7.0，酶解温度40℃，酶解时间4h，得到酶解液；
[0058] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照3:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.4mm，厚度为0.2mm，截留分子量为7000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0059] 对比例2
[0060] 本对比例和实施例3的区别在于，山茶籽粉杀青后未进行均质处理。
[0061] 山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0062] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0063] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱7份、海藻酸2份、聚氧乙烯蓖麻油4份；
[0064] S3、酶解：将质量比2:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到杀青后山茶籽溶液，木聚糖酶活力为80000u/g，碱性蛋白酶活力为50000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.4％，调节pH值7.0，酶解温度40℃，酶解时间4h，得到酶解液；
[0065] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照3:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.4mm，厚度为0.2mm，截留分子量为7000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0066] 对比例3
[0067] 本对比例与实施例3的区别在于，山茶籽乳状液未进行酶解。
[0068] 山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0069] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0070] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为13000rpm，55℃、90MPa，循环2次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱7份、海藻酸2份、聚氧乙烯蓖麻油4份；
[0071] S3、提取离心：将山茶籽乳状液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，山茶籽乳状液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.4mm，厚度为0.2mm，截留分子量为7000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0072] 对比例4
[0073] 本对比例与实施例3的区别在于，所述S4提取离心中将酶解液加入体积分数为95％的乙醇中提取；
[0074] 山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0075] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0076] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为13000rpm，55℃、90MPa，循环2次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱7份、海藻酸2份、聚氧乙烯蓖麻油4份；
[0077] S3、酶解：将质量比2:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为80000u/g，碱性蛋白酶活力为50000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.4％，调节pH值7.0，酶解温度40℃，酶解时间4h，得到酶解液；
[0078] S4、提取离心：将酶解液加入体积分数为95％的乙醇，酶解液和乙醇的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液通过聚乙烯醇PVA中空纤维膜，中空纤维膜的内径为0.4mm，厚度为0.2mm，截留分子量为7000dal，收集透过液，浓缩干燥，得到山茶皂素。
[0079] 对比例5
[0080] 本对比例与实施例3的区别在于，所述S4提取离心中将离心后的上清液通过大孔树脂，流出液干燥得山茶皂素。
[0081] 山茶皂素的提取方法，包括以下步骤：
[0082] S1、预处理：将山茶籽洗净，去壳，粉碎，过筛，得到山茶籽粉；
[0083] S2、杀青：将山茶籽粉加入到80℃脱脂剂中杀青，山茶籽粉和脱脂剂的质量体积比g/mL为1:12；然后再在均质机中均质处理，均质条件为转速为13000rpm，55℃、90MPa，循环2次，制得山茶籽乳状液；所述脱脂剂包括以下重量份原料：椰油酰胺基丙基甜菜碱7份、海藻酸2份、聚氧乙烯蓖麻油4份；
[0084] S3、酶解：将质量比2:1的木聚糖酶、碱性蛋白酶加入到山茶籽乳状液中，木聚糖酶活力为80000u/g，碱性蛋白酶活力为50000u/g，加入量为山茶籽乳状液重量的0.4％，调节pH值7.0，酶解温度40℃，酶解时间4h，得到酶解液；
[0085] S4、提取离心：将酶解液加入乙醇‑双丙甘醇复合溶液，乙醇‑双丙甘醇复合溶液是将体积分数为95％的乙醇和双丙甘醇按照3:1的体积混合，酶解液和乙醇‑双丙甘醇复合溶液的体积比为1:6，升温至75℃，水浴回流6h，回流提取完成后，静置，离心，取上清液，然后将上清液以0.6mL/min流速通过Amberlite XAD7HP大孔树脂装入柱中，使用80％的乙醇洗脱，流出液干燥得山茶皂素。
[0086] 一、山茶皂素测定
[0087] (1)提取率测定：将上述实施例1～5和对比例1～5提取的山茶皂素按以下公式计算出山茶皂素提取率；
[0088] 山茶皂素提取率＝(山茶皂素质量/原料质量)×100％
[0089] (2)纯度测定：采用高效液相色谱法进行检测：
[0090] 检测波长为215nm，
[0091] 流动相：甲醇：异丙醇：正己烷：水＝0.18：0.32：0.04：0.01v/v，[0092] 柱温：30℃，流动相流速为1.5ml/min，流动相溶解样品，
[0093] 进样浓度：1.5mg/ml。
[0094]
[0095]
[0096] 注：以上数据均为三组平行试验
[0097] 由上述结果可知，本发明山茶皂素的提取方法得到的山茶皂素提取率高，纯度高；
[0098] 实施例1～5和对比例1比较，明显可知，本发明在制备的脱脂剂中杀青，破坏和钝化山茶籽粉中氧化酶活性，将其中脂溶性物质从山茶籽粉中分离，降低了山茶籽粉的杂质；
[0099] 与对比例2比较，山茶籽粉脱脂剂均质处理后，破碎山茶籽原来脂肪球，将大脂肪球破碎成小脂肪球，减少脂肪球在山茶籽粉脱脂剂中的浮力，从而降低山茶籽脂溶物的分离程度，提高后续提取山茶皂素的纯度；
[0100] 与对比例3比较，山茶籽乳状液进行酶解，酶解山茶籽中的细胞壁，有效提高被提取物质的溶出，显著提高山茶皂素的提取率；
[0101] 与对比例4比较，选择乙醇‑双丙甘醇复合溶液，充分将山茶籽乳状液中的复杂结构的山茶皂素完好提取；
[0102] 与对比例5比较，上清液通过中空纤维膜上孔洞进行流动，实现最内层的生物功能材料层对葡萄糖、乳酸或过氧化氢特异性催化分解，获得的山茶皂素纯度更高。
[0103] 以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
