[0040] 应该指出,以下详细说明都是例示性的,旨在对本公开提供进一步的说明。除非另有指明,本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
[0041] 需要注意的是,这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式,而非意图限制根据本公开的示例性实施方式。如在这里所使用的,除非上下文另外明确指出,否则单数形式也意图包括复数形式,此外,还应当理解的是,当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时,其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
[0042] 正如背景技术所介绍的,现有技术中的酸性pH荧光探针在强酸条件及水环境中的稳定性较差,难以适应较强酸性pH检测条件,限制了pH荧光探针的应用范围,为了解决如上的技术问题,本公开提出了一种结构新颖的酸性pH荧光探针化合物。
[0043] 为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本公开的技术方案,以下将结合具体的实施例与对比例详细说明本公开的技术方案。
[0044] 实施例1酸性pH荧光探针的合成。
[0045] 酸性pH荧光探针化合物,分子结构式如前述的式Ⅰ。
[0046] 制备方法步骤如下:
[0047] 取5-吲哚甲醛和4-氨基三苯胺溶于乙醇溶剂,加入两滴冰乙酸,在60-70℃下回流5-6h,冷却至室温,抽滤,并用无水乙醇洗涤、干燥,得到PH探针化合物。1H NMR(400MHz,DMSO)δ11.74(s,1H),8.72(s,1H),8.35(d,J=7.7Hz,1H),7.97(d,J=1.9Hz,1H),7.51–
7.40(m,1H),7.29(t,J=7.7Hz,4H),7.23–7.10(m,4H),7.02(t,J=9.3Hz,8H).
[0048] 实施例2化合物的制备
[0049] a.4-硝基三苯胺制备
[0050] 将三苯胺和适量的二氯甲烷缓慢地加入圆底烧瓶中,在0℃下缓慢地滴加浓硝酸,搅拌反应3h,旋蒸除去二氯甲烷,过滤,水洗,乙醇重结晶,干燥得到黄色固体。三苯胺与硝酸的摩尔比为1:3。
[0051] b.4-氨基三苯胺制备
[0052] 将4-硝基三苯胺溶于乙醇溶液中,然后加入钯碳,通入氢气作为还原剂。然后在68℃情况下,反应6.5h,过滤除去钯碳,旋蒸除去乙醇,过滤除去钯碳。选用一定的二氯甲烷和甲醇进行柱层析,收集第一个点,得到淡紫色固体,产率为61%。
[0053] 4-硝基三苯胺和钯碳的质量比为1:0.05;还原剂为氢气,反应时间为8h。二氯甲烷和甲醇的体积比为98:2。
[0054] c.化合物Ⅰ的合成
[0055] 取5-吲哚甲醛和4-氨基三苯胺溶于乙醇溶剂,加入两滴冰乙酸,在65℃下回流6h,冷却至室温,抽滤,并用无水乙醇洗涤、干燥,得到酸性pH探针化合物。
[0056] 5-吲哚甲醛和4-氨基三苯胺的摩尔比为1:1;催化剂为冰乙酸。
[0057] 实施例3化合物的制备
[0058] a.4-硝基三苯胺制备
[0059] 将三苯胺和适量的二氯甲烷缓慢地加入圆底烧瓶中,在0℃下缓慢地滴加浓硝酸,搅拌反应2h,旋蒸除去二氯甲烷,过滤,水洗,乙醇重结晶,干燥得到黄色固体。三苯胺与硝酸的摩尔比为1:1。
[0060] b.4-氨基三苯胺制备
[0061] 将4-硝基三苯胺溶于乙醇溶液中,然后加入钯碳,通入氢气作为还原剂。然后在60℃情况下,反应6h,过滤除去钯碳,旋蒸除去乙醇,过滤除去钯碳。选用一定的二氯甲烷和甲醇进行柱层析,收集第一个点,得到淡紫色固体,产率为58%。
[0062] 4-硝基三苯胺和钯碳的质量比为1:0.08;还原剂为氢气,反应时间为10h。二氯甲烷和甲醇的体积比为98:4。
[0063] c.化合物Ⅰ的合成
[0064] 取5-吲哚甲醛和4-氨基三苯胺溶于乙醇溶剂,加入两滴冰乙酸,在70℃下回流10h,冷却至室温,抽滤,并用无水乙醇洗涤、干燥,得到酸性pH探针化合物。
[0065] 5-吲哚甲醛和4-氨基三苯胺的摩尔比为1:1.05;催化剂为冰乙酸。
[0066] 实施例4酸性pH荧光探针化合物性能实验
[0067] 将探针Ⅰ配置1×10-3mol/L的溶液,溶剂为N,N-二甲基甲酰胺。通过调节盐酸和氢氧化钠的浓度,用pH测试仪配制PH为2,2.5,3,3.5,4,4.5,5,5.5,6,6.5,7,7.5,8的水溶液。最后从1×10-3mol/L的溶液取50uL,用不同pH的水溶液定溶到5mL。超声五分钟使其充分混匀然后进行测试,再分别测试混合液的紫外吸收光谱和荧光发射光谱。先进行紫外吸收光谱测试,获得最大吸收波长再作为荧光激发波长测试其单光子荧光性能,扫描波长范围为
200nm-700nm,激发波长300nm。扫描波长和荧光强度的关系如图3(a)所示。为了更清楚的观察,取419nm的荧光强度值做的图3(b)。荧光强度随着pH的增大而减小,当到达pH=7以后,荧光强度几乎不变。这说明,探针Ⅰ对酸性水溶液具有良好的响应,是一个良好的酸性pH探针。
[0068] 以上所述仅为本公开的优选实施例而已,并不用于限制本公开,对于本领域的技术人员来说,本公开可以有各种更改和变化。凡在本公开的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本公开的保护范围之内。