[0018] 下面通过具体实施方式,对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
[0019] 实施例1
[0020] 本发明从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,包括步骤如下:(1)将葡萄籽用煮沸冷却的自来水或超纯水洗净、自然晾干或烘干,获得干燥的葡萄籽材料,然后粉碎至粒径小于20目的颗粒;
[0021] (2)将预处理后的葡萄籽和丙酮溶液按照质量:体积比为1:10~20(kg:L)的比例混合,并搅拌均匀后放置12~36小时,优选24小时,以促进葡萄籽中所含的活性成分充分溶出;
[0022] (3)去除葡萄籽残渣得到葡萄籽浸提液,再经减压浓缩回收丙酮,即得到葡萄籽浸提物的水溶液,调整水溶液体积至原丙酮溶液体积;
[0023] (4)将水溶液用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至12,用正己烷萃取3次后,再将水溶液用2mol/L的盐酸调节pH至5,用乙酸乙酯萃取3次,收集上层乙酸乙酯部分合并3次乙酸乙酯萃取液,旋蒸回收乙酸乙酯,获得葡萄籽浸膏;
[0024] (5)将葡萄籽浸膏用二甲基亚砜助溶后即制得最终的抑藻剂。
[0025] 用于抑制水中藻类生长时,将制得的抑藻剂加入以蓝藻为优势种的小型景观水体中,放置48~120小时,以使抑藻剂和水中的藻类接触,达到抑制藻类生长的目的。使用时,根据水体中藻细胞数量通过实验确定抑藻剂用量。
[0026] 实施例2
[0027] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,包括步骤如下:
[0028] (1)将预处理后的葡萄籽和丙酮溶液按照质量:体积比为1:20~30(kg:L)的比例混合;
[0029] (2)使用定性滤纸去除葡萄籽残渣得到葡萄籽浸提液,再经减压浓缩回收丙酮,得到葡萄籽浸提物的水溶液,调整水溶液体积至原丙酮溶液体积;
[0030] (3)将水溶液用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至12,用正己烷萃取3次后,再将水溶液用2mol/L的盐酸调节pH至5,用乙酸乙酯萃取3次,收集上层乙酸乙酯部分合并3次乙酸乙酯萃取液,旋蒸回收乙酸乙酯,获得葡萄籽浸膏;
[0031] (4)将葡萄籽浸膏用二甲基亚砜助溶后即制得最终的抑藻剂。
[0032] 实施例3
[0033] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与实施例1或实施例2的不同之处在于:步骤(1)中,所述预处理的步骤包括葡萄籽清洗、晾干或烘干、粉碎的过程:将葡萄籽用煮沸冷却的自来水或超纯水洗净、自然晾干或烘干,获得干燥葡萄籽材料,粉碎至粒径小于20目的颗粒。
[0034] 然后,将预处理后的葡萄籽和丙酮溶液按照质量:体积比为1:15~25(kg:L)的比例混合;并搅拌均匀后放置12~36小时,以促进葡萄籽中所含的活性成分充分溶出。
[0035] 实施例4
[0036] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:步骤(1)中,所述的丙酮溶液体积分数为50%~90%。
[0037] 实施例5
[0038] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与丙酮溶液按照质量:体积比为1:10的比例混合。
[0039] 实施例6
[0040] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与丙酮溶液按照质量:体积比为1:20的比例混合。
[0041] 实施例7
[0042] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与丙酮溶液按照质量:体积比为1:30的比例混合。
[0043] 实施例8
[0044] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与丙酮溶液按照质量:体积比为1:15的比例混合。
[0045] 实施例9
[0046] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与丙酮溶液按照质量:体积比为1:25的比例混合。
[0047] 实施例10
[0048] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与体积分数为50%的丙酮溶液混合。
[0049] 实施例11
[0050] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与体积分数为70%的丙酮溶液混合。
[0051] 实施例12
[0052] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与体积分数为90%的丙酮溶液混合。
[0053] 实施例13
[0054] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与体积分数为60%的丙酮溶液混合。
[0055] 实施例14
[0056] 本实施例从葡萄籽中提取抑藻活性成分制备抑藻剂的方法,与前述各实施例的不同之处在于:将预处理后的葡萄籽与体积分数为80%的丙酮溶液混合。
[0057] 下面结合实验室的研究结果对本发明天然抑藻活性成分的提取方法、抑藻剂的制备及其用于抑制水中藻类生长的方法及过程进一步说明。
[0058] 实验1
[0059] 取葡萄籽用煮沸冷却的自来水冲洗干净,自然晾干,粉碎至粒径小于20目的颗粒。以体积分数为50%的丙酮溶液为提取溶剂,将50.0g葡萄籽粉末浸泡在1500mL50%的丙酮溶液中,放置24小时,使用滤纸去除葡萄籽残渣得到葡萄籽浸提液,再经减压浓缩回收丙酮,即可,得到葡萄籽浸提物的水溶液,调整水溶液体积至1500 mL;将水溶液用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至12,用正己烷萃取3次后,再将水溶液用2mol/L的盐酸调节pH至5,用乙酸乙酯萃取3次,收集上层乙酸乙酯部分合并3次乙酸乙酯萃取液,旋蒸回收乙酸乙酯,获得葡萄籽浸膏;将葡萄籽浸膏用二甲基亚砜助溶后即制得最终的抑藻剂。取抑藻剂加到藻浓度
5
为7.8×10 个/mL的水体中,使抑藻剂的最终浓度为40 mg/L,放置72 h,抑藻率可达到
68.31%。
[0060] 实验2
[0061] 取葡萄籽用煮沸冷却的自来水冲洗干净,自然晾干,粉碎至粒径小于20目的颗粒。以体积分数为70%的丙酮溶液为提取溶剂,将50.0g葡萄籽粉末浸泡在1000mL70%的丙酮溶液中,放置24小时,使用滤纸去除葡萄籽残渣得到葡萄籽浸提液,再经减压浓缩回收丙酮,即可,得到葡萄籽浸提物的水溶液,调整水溶液体积至1000 mL;将水溶液用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至12,用正己烷萃取3次后,再将水溶液用2mol/L的盐酸调节pH至5,用乙酸乙酯萃取3次,收集上层乙酸乙酯部分合并3次乙酸乙酯萃取液,旋蒸回收乙酸乙酯,获得葡萄籽浸膏;将葡萄籽浸膏用二甲基亚砜助溶后即制得最终的抑藻剂。取抑藻剂加到藻浓度为9.4×105个/mL的水体中,使抑藻剂的最终浓度为40 mg/L,放置72 h,抑藻率可达到
77.16%。
[0062] 实验3
[0063] 取葡萄籽用蒸馏水冲洗干净,烘干,粉碎至粒径小于20目的颗粒。以体积分数为90%的丙酮溶液为提取溶剂,将50.0g葡萄籽粉末浸泡在750mL90%的丙酮溶液中,放置24小时,使用滤纸去除葡萄籽残渣得到葡萄籽浸提液,再经减压浓缩回收丙酮,即可,得到葡萄籽浸提物的水溶液,调整水溶液体积至750 mL;将水溶液用2mol/L的氢氧化钠溶液调节pH至12,用正己烷萃取3次后,再将水溶液用2mol/L的盐酸调节pH至5,用乙酸乙酯萃取3次,收集上层乙酸乙酯部分合并3次乙酸乙酯萃取液,旋蒸回收乙酸乙酯,获得葡萄籽浸膏;将葡萄籽浸膏用二甲基亚砜助溶后即制得最终的抑藻剂。取抑藻剂加到藻浓度为7.1×105个/mL的水体中,使抑藻剂的最终浓度为40 mg/L,放置72 h,抑藻率可达到70.59%。