[0018] 现在结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明。
[0019] 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
[0020] 1)选取900‑1100目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
[0021] 2)配制固体培养基，110‑130℃高压灭菌15‑25min后制备平板，平板厚度0.4‑0.6cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面
0.4‑0.6cm，然后冷却凝固；
[0022] 3)将已培养3‑4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.15‑0.25mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置4‑6min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
[0023] 4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透900‑1100目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
[0024] 5)8‑12min后，用0.15‑0.25mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
[0025] 6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，18‑22℃培养45‑50h，得L4期线虫。
[0026] 所述固体培养基为NGM固体培养基。
[0027] 所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为1500‑2500rpm，离心时间均为0.5‑1.5min。
[0028] NaCl溶液的浓度为180‑220mmol/L。
[0029] 实施例1
[0030] 1)选取1000目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
[0031] 2)配制NGM固体培养基，121℃高压灭菌20min后制备平板，平板厚度0.5cm左右，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.5cm左右，冷却凝固；
[0032] 3)将已培养3‑4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.2mLM9缓冲液冲洗至1.5mL离心管中离心，2000rpm，1min，去上清，静置5min后，将其转移至NGM培养基的圆环形过滤网中；
[0033] 4)配制浓度为200mM的NaCl溶液作为线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在浓盐水的驱避作用下，线虫逃散，L1期的线虫可以穿透1000目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
[0034] 6)10min后,用0.2mLM9缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至1.5mL离心管中离心，2000rpm，1min，弃上清，重复冲洗3次，得L1期线虫；
[0035] 7)将L1期线虫接至含大肠杆菌的NGM培养基中，20℃培养48h，得L4期线虫。
[0036] 实施例2
[0037] 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
[0038] 1)选取1050目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
[0039] 2)配制固体培养基，125℃高压灭菌21min后制备平板，平板厚度0.45cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.45cm，然后冷却凝固；
[0040] 3)将已培养3天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.17mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置4.5min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
[0041] 4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透1050目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
[0042] 5)12min后，用0.21mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
[0043] 6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，21℃培养48h，得L4期线虫。
[0044] 所述固体培养基为NGM固体培养基。
[0045] 所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为2200rpm，离心时间均为1.2min。
[0046] NaCl溶液的浓度为210mmol/L。
[0047] 实施例3
[0048] 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
[0049] 1)选取980目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
[0050] 2)配制固体培养基，118℃高压灭菌21min后制备平板，平板厚度0.45cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.45cm，然后冷却凝固；
[0051] 3)将已培养3‑4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.19mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置5.1min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
[0052] 4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透980目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
[0053] 5)11min后，用0.22mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
[0054] 6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，21℃培养48h，得L4期线虫。
[0055] 所述固体培养基为NGM固体培养基。
[0056] 所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为2100rpm，离心时间均为1.2min。
[0057] NaCl溶液的浓度为210mmol/L。
[0058] 实施例4
[0059] 一种新型秀丽隐杆线虫同步化的方法，其包括以下步骤：
[0060] 1)选取1020目尼龙筛网，将其制作成直径1cm、高度1cm的圆环型过滤网；
[0061] 2)配制固体培养基，123℃高压灭菌21min后制备平板，平板厚度0.51cm，在培养基凝固之前，将圆环型过滤网置于平板中央，过滤网高度超过培养基表面0.51cm，然后冷却凝固；
[0062] 3)将已培养4天的处于不用时期的秀丽隐杆线虫用0.21mL缓冲液冲洗到离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，静置5min后，将其转移至培养基的圆环形过滤网中；
[0063] 4)NaCl溶液作为秀丽隐杆线虫的驱避剂，将其滴加至圆环型过滤网中使线虫趋避扩散，在盐水的驱避作用下，秀丽隐杆线虫逃散，L1期的秀丽隐杆线虫穿透1020目尼龙筛网，活动于圆环型过滤网外侧的培养基上；
[0064] 5)11min后，用0.21mL缓冲液冲洗圆环型过滤网外侧的培养基上的L1期的线虫至离心管中，然后将离心管放置到离心机中离心，弃去上清液，重复冲洗3次，得L1期秀丽隐杆线虫；
[0065] 6)将L1期秀丽隐杆线虫接至含大肠杆菌的培养基中，21℃培养49h，得L4期线虫。
[0066] 所述固体培养基为NGM固体培养基。
[0067] 所述步骤3和5中的缓冲液均为M9缓冲液，离心管均为1.5mL规格的离心管，离心过程的离心转速均为2100rpm，离心时间均为1.25min。
[0068] NaCl溶液的浓度为195mmol/L。
[0069] 最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
