盲专网 - 一种利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法

专利申请流程有哪些步骤？

申请

申请号：指国家知识产权局受理一件专利申请时给予该专利申请的一个标示号码。唯一性原则。

申请日：提出专利申请之日。

2013-08-09

申请公布

申请公布指发明专利申请经初步审查合格后，自申请日（或优先权日）起18个月期满时的公布或根据申请人的请求提前进行的公布。

申请公布号：专利申请过程中，在尚未取得专利授权之前，国家专利局《专利公报》公开专利时的编号。

申请公布日：申请公开的日期，即在专利公报上予以公开的日期。

2016-09-07

授权

授权指对发明专利申请经实质审查没有发现驳回理由，授予发明专利权；或对实用新型或外观设计专利申请经初步审查没有发现驳回理由，授予实用新型专利权或外观设计专利权。

2017-12-15

预估到期

发明专利权的期限为二十年，实用新型专利权期限为十年，外观设计专利权期限为十五年，均自申请日起计算。专利届满后法律终止保护。

2033-08-09

基本信息

有效性	有效专利	专利类型	发明专利
申请号	CN201310344302.6	申请日	2013-08-09
公开/公告号	CN103387619B	公开/公告日	2017-12-15
授权日	2017-12-15	预估到期日	2033-08-09
申请年	2013年	公开/公告年	2017年
缴费截止日
分类号	C08B37/00	主分类号	C08B37/00
是否联合申请	独立申请	文献类型号	B
独权数量	1	从权数量	2
权利要求数量	3	非专利引证数量	1
引用专利数量	7	被引证专利数量	0
非专利引证	1、申瑞玲等.燕麦麸非淀粉多糖提取工艺的研究《.粮油加工》.2008,;
引用专利	CN101104647A、CN102077898A、CN102217700A、CN102180984A、CN102232464A、CN103130908A、CN102199224A	被引证专利
专利权维持	8	专利申请国编码	CN
专利事件	转让	事务标签	公开、实质审查、授权、权利转移

申请人信息

申请人	青岛博研达工业技术研究所(普通合伙)	第一申请人	青岛博研达工业技术研究所(普通合伙)
专利权人	青岛博研达工业技术研究所(普通合伙)	当前专利权人	嘉兴传盛机械设备有限公司
发明人	邵艳艳、黄斐斐、杨丽丽	第一发明人	邵艳艳
地址	山东省青岛市平度市经济开发区泉州路58-10号	邮编	266700
申请人数量	1	发明人数量	3
申请人所在省	山东省	申请人所在市	山东省青岛市

代理人信息

代理机构

专利代理机构是经省专利管理局审核，国家知识产权局批准设立，可以接受委托人的委托，在委托权限范围内以委托人的名义办理专利申请或其他专利事务的服务机构。

代理人

专利代理师是代理他人进行专利申请和办理其他专利事务，取得一定资格的人。

摘要

本发明公开了一种利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法，包括以下步骤：花生粕粉与蒸馏水混合均匀，调节pH值，加入复合植物水解酶Viscozyme L，微波加热酶解，得到酶解液；调节酶解液pH值，加入复合蛋白酶，微波加热酶解，灭酶，离心；上清液加入4倍体积的无水乙醇，冰箱内静置过夜，离心，沉淀经乙醇和丙酮洗涤后冷冻干燥得到花生非淀粉多糖。以本发明制得的花生非淀粉多糖具有抗氧化、降血糖的功能活性，适合工业化生产。

摘要附图

法律状态

序号	法律状态公告日	法律状态	法律状态信息
1	2021-12-10	专利权的转移	登记生效日: 2021.11.30 专利权人由兴化市嘉睿照明电器有限公司变更为嘉兴传盛机械设备有限公司地址由225700 江苏省泰州市兴化市江浙商业广场B区I幢I013室变更为314000 浙江省嘉兴市桐乡市梧桐街道振兴东路丰润国际商务中心635室-1098
2	2017-12-15	授权
3	2017-12-05	著录事项变更	发明人由王云志王生雷变更为邵艳艳黄斐斐杨丽丽
4	2016-09-07	实质审查的生效	IPC(主分类): C08B 37/00 专利申请号: 201310344302.6 申请日: 2013.08.09
5	2013-11-13	公开

权利要求

权利要求书是申请文件最核心的部分，是申请人向国家申请保护他的发明创造及划定保护范围的文件。

1.一种利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法，包括以下步骤：
（1）花生粕粉碎过100 目筛得到花生粕粉，加入蒸馏水，微波催化/ 合成仪中混合均匀，调节pH 值，加入复合植物水解酶Viscozyme L，微波催化/ 合成仪中加热酶解，得到酶解液；
（2）调节酶解液pH 值，加入复合蛋白酶，微波催化/ 合成仪中加热酶解，灭酶，离心；所述的pH 值调节至8.3-8.8，复合蛋白酶为碱性蛋白酶Alcalase、胰蛋白酶以2.8:1.5 比例混合的复合酶，加入量为每克花生粕粉4100-6300U（U 为复合蛋白酶的酶活单位），酶解的条件为微波功率900w、加热温度61.7℃、加热时间6.2-8.2min，100℃灭酶5min，6300r/min 离心15min；
（3）上清液加入4 倍体积的无水乙醇，冰箱中静置过夜，离心，沉淀经乙醇和丙酮洗涤后冷冻干燥得到花生非淀粉多糖。

2.根据权利要求1 所述的利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法，其特征在于：
步骤（1）所述的花生粕粉与蒸馏水的质量与体积比为1:8.6-9.6（g/ml），微波功率900w、加热温度50.7℃、加热时间1.5min 条件下混合均匀，pH 值调节至5.6-5.9，Viscozyme L 加入量为每克花生粕粉15.3-17.3FBG（FBG 为Viscozyme L 的酶活单位），微波功率900w、加热温度50.7℃、加热时间4.8-6.8min 条件下酶解。

3.根据权利要求1 所述的利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法，其特征在于：
步骤（3）所述的离心条件为6300r/min 离心15min，冷冻干燥条件为-55℃、真空度0.1MPa，干燥36h。

说明书

技术领域

[0001] 本发明涉及利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法，属于食品营养活性物质加工领域。

背景技术

[0002] 花生为豆科一年生草本植物，含有25%-36%的蛋白质和10%-23%的碳水化合物。花生果提取油脂后剩余的淡褐色或深褐色的小块状或粉末状的副产物称为花生粕，每年产量达400万吨，是一种大宗蛋白质和多糖资源。花生粕酶解物经乙醇沉淀后可得到可溶性的非淀粉多糖，它是一类包含还原糖、中性糖、糖醛酸或糖蛋白在内的混合多糖，具有清除自由基、抗病毒、抗肿瘤、降血糖、提高免疫力等作用。糖尿病是一种糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱疾病，病因是葡萄糖生成增多，但利用减弱，从而血糖增高甚至尿糖。研究表明，多糖的降血糖活性的机理包括以下3点：通过调节糖代谢酶的活性调节血糖水平、减慢胃的排空速度以便减少葡萄糖的吸收速度和清除自由基作用。

[0003] 花生非淀粉多糖是一种淡黄色或淡棕色、略带糖香气的粉末状固体，易溶于水。该产品具有较好的清除自由基、抑制α-葡萄糖苷酶活性以及降血糖作用。花生非淀粉多糖可逆性竞争抑制小肠绒毛膜中参与碳水化合物降解的α-葡萄糖苷酶活性，延缓淀粉、蔗糖、麦芽糖的分解，使葡萄糖的消化减缓，控制餐后血糖的升高，预防和改善因高血糖引起的并发症的发生和发展。花生非淀粉多糖可作为天然的降血糖保健品，用于糖尿病的辅助治疗产品；也可添加到烘焙食品、饮料制品中作为天然抗氧化剂，防止食品氧化，改善食品品质并减少合成食品添加剂的使用量。

[0004] 目前，从花生粕中制备花生非淀粉多糖多采用热水、乙醇溶液、酸溶液或碱溶液浸提的方法。热水浸提耗能大，效率低，需浸提多次，后续除去浸提液中的水分还得消耗大量能源且耗时长，不适合工业化生产。乙醇溶液浸提法中花生非淀粉多糖长时间在乙醇中结构易受破坏，提取率低，产品活性低。酸和碱溶液浸提法条件苛刻，花生非淀粉多糖易变性，且生产废液易污染环境。因此，需要一种条件温和、耗能低、提取率高、环境友好、花生非淀粉多糖产品活性高，且工业化生产前景广阔的提取花生非淀粉多糖的方法。

发明内容

[0005] 本发明的目的在于为解决上述技术中存在的技术难题，提供一种利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法。该方法采用微波辅助复合植物水解酶和复合蛋白酶分步酶解技术水解花生粕的细胞壁组织以及蛋白质组分，在较短的时间和温和的条件下提取花生非淀粉多糖，很大程度上提高了提取率，且花生非淀粉多糖活性高，生产工艺环境友好。

[0006] 为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种利用热榨花生粕制备花生非淀粉多糖的方法，其步骤包括：

[0007] 一、花生粕粉处理：花生粕粉碎过100目筛，取筛下物作为原料用花生粕粉，加入蒸馏水，微波催化/合成仪中混合均匀，调节pH值，加入复合植物水解酶Viscozyme L（其中包括阿拉伯聚糖酶、纤维素酶、β-葡聚糖酶、半纤维素酶和木聚糖酶在内的复合多糖酶），微波催化/合成仪中加热酶解，得到酶解液；

[0008] 二、调节酶解液pH值，加入复合蛋白酶，微波催化/合成仪中加热酶解，灭酶，离心；

[0009] 三、上清液加入4倍体积的无水乙醇，冰箱中静置过夜，离心，沉淀经乙醇和丙酮洗涤后冷冻干燥得到花生非淀粉多糖。

[0010] 优选地，步骤一所述的花生粕粉与蒸馏水的质量与体积比为1:8.6-9.6（g/ml），微波功率900w、加热温度50.7℃、加热时间1.5min条件下混合均匀，pH值调节至5.6-5.9，Viscozyme L加入量为每克花生粕粉15.3-17.3FBG（FBG为Viscozyme L的酶活单位），微波功率900w、加热温度50.7℃、加热时间4.8-6.8min条件下酶解。

[0011] 优选地，步骤二所述的pH值调节至8.3-8.8，复合蛋白酶为碱性蛋白酶Alcalase、胰蛋白酶以2.8:1.5比例混合的复合酶，加入量为每克花生粕粉4100-6300U（U为复合蛋白酶的酶活单位），酶解的条件为微波功率900w、加热温度61.7℃、加热时间6.2-8.2min，100℃灭酶5min，6300r/min离心15min。

[0012] 优选地，步骤三所述的离心条件为6300r/min离心15min，冷冻干燥条件为-55℃、真空度0.1MPa，干燥36h。

[0013] 本发明的有益效果是：根据本发明，能够提供具有抗氧化、降血糖功能活性的花生非淀粉多糖。

实施方案

[0014] 采用苯酚-硫酸法测定己糖含量、地衣酚比色法测定戊糖含量、咔唑-硫酸比色法测定糖醛酸含量，按照己糖、戊糖、糖醛酸在非淀粉多糖中的权重比，根据公式：非淀粉多糖含量=己糖含量×0.9 + 戊糖含量×0.88 + 糖醛酸含量×0.81，计算出本发明实施例中提取的花生非淀粉多糖的纯度。

[0015] 实施例1

[0016] 花生粕粉碎过100目筛，取筛下物作为原料用花生粕粉，以1:8.9（g/ml）的比例向花生粕粉中加入蒸馏水，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度50.7℃条件，微波加热1.5min使花生粕粉和蒸馏水混合均匀，调节混合液pH值至5.8，加入每克花生粕粉15.3FBG（FBG为复合植物水解酶Viscozyme L的酶活单位）的Viscozyme L，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度50.7℃条件，酶解5.2min，得到Viscozyme L酶解液；调节Viscozyme L酶解液的pH值至8.4，加入每克花生粕粉4756U（U为碱性蛋白酶Alcalase、胰蛋白酶以2.8:1.5比例混合的复合蛋白酶的酶活单位）的复合蛋白酶，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度61.7℃条件，酶解7.1min，得到复合蛋白酶酶解液，酶解液在
100℃灭酶5min，以6300r/min转速离心15min；上清液中加入4倍于上清液体积的无水乙醇，冰箱中静置过夜，以6300r/min转速离心15min，沉淀经乙醇和丙酮洗涤后在-55℃、真空度
0.1MPa条件下，干燥36h得到花生非淀粉多糖。花生非淀粉多糖的纯度为91.58%；抗氧化作用包括：体外清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的IC50值分别为
1.28mg/mL、1.96mg/mL、1.53mg/mL和0.99mg/mL；降血糖功能活性包括：体外对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值为67.78mg/L，对链脲佐菌素、盐酸肾上腺素和四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的降血糖作用，饲喂花生非淀粉多糖治疗实验后的空腹血糖值比实验前分别降低了
78.43%、82.58%和85.35%。

[0017] 实施例2

[0018] 花生粕粉碎过100目筛，取筛下物作为原料用花生粕粉，以1:9.2（g/ml）的比例向花生粕粉中加入蒸馏水，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度50.7℃条件，微波加热1.5min使花生粕粉和蒸馏水混合均匀，调节混合液pH值至5.7，加入每克花生粕粉16.4FBG（FBG为复合植物水解酶Viscozyme L的酶活单位）的Viscozyme L，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度50.7℃条件，酶解5.2min，得到Viscozyme L酶解液；调节Viscozyme L酶解液的pH值至8.6，加入每克花生粕粉5658U（U为碱性蛋白酶Alcalase、胰蛋白酶以2.8:1.5比例混合的复合蛋白酶的酶活单位）的复合蛋白酶，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度61.7℃条件，酶解7.5min，得到复合蛋白酶酶解液，酶解液在
100℃灭酶5min，以6300r/min转速离心15min；上清液中加入4倍于上清液体积的无水乙醇，冰箱中静置过夜，以6300r/min转速离心15min，沉淀经乙醇和丙酮洗涤后在-55℃、真空度
0.1MPa条件下，干燥36h得到花生非淀粉多糖。花生非淀粉多糖的纯度为90.05%；抗氧化作用包括：体外清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的IC50值分别为
1.34mg/mL、1.99mg/mL、1.61mg/mL和1.05mg/mL；降血糖功能活性包括：体外对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值为69.03mg/L，对链脲佐菌素、盐酸肾上腺素和四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的降血糖作用，饲喂花生非淀粉多糖治疗实验后的空腹血糖值比实验前分别降低了
75.67%、80.59%和83.24%。

[0019] 实施例3

[0020] 花生粕粉碎过100目筛，取筛下物作为原料用花生粕粉，以1:9.5（g/ml）的比例向花生粕粉中加入蒸馏水，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度50.7℃条件，微波加热1.5min使花生粕粉和蒸馏水混合均匀，调节混合液pH值至5.9，加入每克花生粕粉17.2FBG（FBG为复合植物水解酶Viscozyme L的酶活单位）的Viscozyme L，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度50.7℃条件，酶解6.4min，得到Viscozyme L酶解液；调节Viscozyme L酶解液的pH值至8.8，加入每克花生粕粉6268U（U为碱性蛋白酶Alcalase、胰蛋白酶以2.8:1.5比例混合的复合蛋白酶的酶活单位）的复合蛋白酶，在微波催化/合成仪中，以微波功率900w、加热温度61.7℃条件，酶解8.0min，得到复合蛋白酶酶解液，酶解液在
100℃灭酶5min，以6300r/min转速离心15min；上清液中加入4倍于上清液体积的无水乙醇，冰箱中静置过夜，以6300r/min转速离心15min，沉淀经乙醇和丙酮洗涤后在-55℃、真空度
0.1MPa条件下，干燥36h得到花生非淀粉多糖。花生非淀粉多糖的纯度为92.36%；抗氧化作用包括：体外清除羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的IC50值分别为
1.12mg/mL、1.68mg/mL、1.31mg/mL和0.75mg/mL；降血糖功能活性包括：体外对α-葡萄糖苷酶抑制活性的IC50值为64.47mg/L，对链脲佐菌素、盐酸肾上腺素和四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的降血糖作用，饲喂花生非淀粉多糖治疗实验后的空腹血糖值比实验前分别降低了
79.68%、85.32%和88.69%。

[0021] 以上所述，仅为本发明的具体实施方式，并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

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