[0031] 以下结合实施例对本发明作进一步详细说明。
[0032] 本发明凤尾菇MT(Pleurotus Sajor‑caju MT)，于2021年1月4 日保藏于中国典型培养物保藏中心，该中心地址为：湖北省武汉市武昌区八一路武汉大学；保藏编号为CCTCC M 2021011。
[0033] 实施例1
[0034] 本实施例应用所述凤尾菇MT制备治疗急性早幼粒细胞白血病 (APL)药物的方法，包括以下步骤：
[0035] (1)凤尾菇MT培养料制备：
[0036] 称取NaAsO2干燥恒重粉末8.6699g溶于1000mL去离子水中，得到5g/L的砷溶液，121℃高压灭菌，冷藏备用；
[0037] 培养料配方与制备：棉籽壳80‑90％，玉米芯7‑17％，灰钙粉2‑4％，均为干重；按所述重量百分比称取各原料，混合均匀，即成；上述三种培养料原料的重金属(砷、汞、镉、铅)含量≦1mg/kg；将所述稀释的三价无机砷溶液与2.9‑3.1kg所述培养料混合均匀，使培养料中的砷含量达到80mg/kg，并分装入规格为17cm×33cm×0.045cm的聚乙烯塑料袋；将菌袋高压蒸汽灭菌(121℃，4h)；
[0038] (2)凤尾菇MT菌种接种：每个菌袋的接种量控制在4％(接种通用用量)；温度25℃下，在菌培养房培养25～30d；待菌丝长满袋，将菌袋移至出菇房，温度25℃、湿度80％‑80％、定期通风条件下继续培养；
[0039] (3)首茬子实体收获：在出菇房培养18天，收获首茬凤尾菇子实体；
[0040] (4)干燥、粉碎、装胶囊：将收获的凤尾菇MT首茬子实体干燥，粉碎，装入00#胶囊，每颗胶囊装入量为950±10mg，记为药物①。
[0041] 实施例2
[0042] 本实施例应用所述凤尾菇MT制备治疗急性早幼粒细胞白血病 (APL)药物的方法，包括以下步骤：
[0043] (1)凤尾菇MT菌种种子培养平皿制备；
[0044] 锥形瓶中配制PDA固体培养基(PDA固体培养基为药典固定配方；控制培养基中砷、汞、镉、铅含量≦1mg/kg)，并添加实施例1 中所述三价无机砷母液，使砷含量达到80mg/L；然后将培养基高压蒸汽灭菌(121℃，0.5h)；趁热将所述培养基倒入90mm平皿，每个平皿倒入12‑14mL培养液；
[0045] (2)凤尾菇MT菌种接种：待平皿中的培养液凝固后，采用打孔法接种直径为6mm所述凤尾菇MT菌种菌块，培养菌丝13d；
[0046] (3)菌丝收集：平皿中凤尾菇MT菌丝长成后，收集平皿表层菌丝；
[0047] (4)干燥：将收集的凤尾菇MT菌丝进行真空冷冻干燥，再密封于透明疫苗瓶中，每瓶装量为95±5mg，记为药物②。
[0048] 本发明得到药物，由于砷的毒性导致栽培的凤尾菇生物产量较相应的空白组有所降低，分别降低了11.60％和26.38％左右；ICP‑MS 检测结果显示药物①中砷含量均值为321.82±11.63mg/kg，为子实体空白组的168倍之多，而药物②组砷含量均值为443.23±
13.61mg/kg，为菌丝空白组的180倍之多；细胞试验显示药物①和药物②对慢性粒细胞白血病细胞系K562的生长都具有明显抑制作用，抑制作用与 ATO相当；长、急毒性试验评价表明药物①和药物②对肝脏、肾脏的影响小于ATO，且LD50均比ATO组增大。
[0049] 本发明方法评价
[0050] 生物产量和砷含量评价：子实体空白组(正常培养，菌袋中不添加三价砷)、药物①组、菌丝空白组(正常培养，平皿培养基中不添加三价砷)、药物②组。每组各3个重复。
[0051] 细胞试验和长、急毒性试验评价：药物①组、药物②组、ATO 对照组。
[0052] 1、生物产量：采用干重法。精确称重计算每1kg培养干料凤尾菇子实体干粉质量或100mL培养基冻干菌丝粉质量。本发明得到药物①和药物②，由于砷的毒性影响导致生物产量有所降低，且菌盖变薄，与相应的子实体空白组和菌丝空白组比较，分别降低了约
11.60％和26.38％(参见表1)，说明此凤尾菇品种菌丝及子实体对砷的耐受程度均较高(参见图1)。
[0053] 表1不同处理与生物产量(n＝3)
[0054]
[0055] 2、砷含量：采用电感耦合等离子质谱分析技术(ICP‑MS)检测各干样品中砷含量。由下表2所示数据可知，药物①组干样中砷含量均值为321.82±11.63mg/kg，为子实体空白组的168倍之多，而药物②组干样中砷含量均值为443.23±13.61mg/kg，为菌丝空白组的
180 倍之多，说明在三价砷胁迫作用下，大量砷生物转移或富集到凤尾菇菌丝及子实体中。
[0056] 表2不同处理与砷含量(n＝3)
[0057]
[0058] 2、慢性粒细胞白血病细胞系K562的细胞活性检测：参照文献 (张昆仲,许建华,黄秀旺,等.姜黄素与STI571对慢性粒细胞白血病细胞株K562作用的体外研究[J].福建医科大学学报, 2006(5):427‑430.)方法，选择对数生长期的K562细胞接种于96孔板中，RPMI1640作为培养基，分别加入浓度为10μM的ATO、药物①、药物②，各组5个重复。培养48h后，MTT法酶标仪检测每孔在490nm波长处的吸光度，计算抑制率和IC 50值。结果显示药物①和药物②对慢性粒细胞白血病细胞系K562的生长都具有明显的抑制作用，抑制作用与ATO相当。
[0059] 3、长期毒性试验：SD大鼠饲喂28d，解剖后脏器系数检查结果显示，ATO对照组大鼠肝脏系数和肾脏系数分别为2.34±0.10(％,n＝8)、 0.63±0.03(％,n＝8)，而药物①组大鼠肝脏系数和肾脏系数分别为2.97±0.14(％,n＝8)、0.68±0.02(％,n＝8)，药物②组大鼠肝脏系数和肾脏系数分别为2.73±0.09(％,n＝8)、0.66±0.03(％,n＝8)，表明药物①和药物②对肝脏、肾脏的影响小于ATO。
[0060] 5、急性毒性试验：文献记载ATO急性毒性试验LD50结果为10 mg/kg(大鼠经口)，同质量砷条件下药物①组大鼠急性毒性试验 LD50为25.45±0.62mg/kg(n＝10)，药物②的LD50为19.93±0.45 mg/kg(n＝10)，提示药物①和药物②的LD50与ATO比较增大。
