[0021] 下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
[0022] 需要说明的是,下述实施方案中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
[0023] 实施例1
[0024] 本发明提供一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物,其结构式为式(III):
[0025]
[0026] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法,包括以下步骤:
[0027] 步骤一、将12.06g豆甾醇加入10mL吡啶中,完全溶解后,加入5mL醋酸酐,室温搅拌反应24h,待反应完成后停止反应,加入30mL浓度为1mol/L的稀盐酸后,将产物移入分液漏斗中,用15mL乙酸乙酯连续萃取3次(乙酸乙酯每次用量均为15mL,第一次加入乙酸乙酯后,溶液分层,分层后把有机层分出来,放在锥形瓶里,然后水层用乙酸乙酯继续萃取,水层中萃取完后,再分离出有机层,向水层中加入乙酸乙酯,再分离出有机层),合并有机层,接着向有机层中加入15mL水后,分离出有机层,再将分离出的有机层依次用10mL饱和Na2CO3水溶液、15mL水和20mL饱和食盐水进行萃取(向有机层中加入饱和Na2CO3水溶液后,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层),再将萃取后的有机层用5g无水硫酸钠进行干燥,之后过滤、分离出有机溶剂,得到具有式(I)的白色固体化合物;
[0028]
[0029] 步骤二、将2.2g具有式(I)的白色固体化合物置于充满氩气的双颈茄形反应瓶中,加进干燥的正己烷50mL,室温下搅拌使其完全溶解后,将温度降至-5℃,继续搅拌,另将602μL碘代苯和295μL溴素依次移入5mL正己烷中,充分混匀后冷却至-5℃,得到二溴碘苯溶液,然后将二溴碘苯溶液滴加进双颈茄形反应瓶中,滴加过程反应体系温度为-5℃,2.5小时加完后,继续搅拌1小时,将得到的反应液快速蒸干得到淡黄色油状物一,接着向淡黄色油状物一中加入30mL二氯甲烷使其完全溶解,之后移入带支管的反应烧瓶中,在液氮-乙酸乙酯冷浴中冷至-78℃,在搅拌下通入流量为2.5mL/min的臭氧30min,待反应完成后,加入2mL二甲硫醚,搅拌12h后,加入10mL冰醋酸和6.5g锌粉,在室温下继续搅拌4h,之后过滤,将滤液进行减压蒸馏,得到体积为滤液体积1/5的残液,考虑到残液含有大量乙酸,为了避免萃取过程中出现乳化状况,需要加大水相和有机相的极性差距,具体操作是:将残液用50mL饱和食盐水萃取1次,分离出有机层,分离出的有机层再用40mL体积比为3:1的乙酸乙酯和石油醚的混合液萃取1次,再分离出有机层,分离出的有机层依次用30mL水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水分别萃取1次(向有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和碳酸氢钠水溶液,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层),再将分离出的有机层进行减压蒸馏,得到淡黄色油状物二,之后向淡黄色油状物二中加入30mL甲醇和3mL质量分数为13%的碳酸钾水溶液,室温下搅拌0.5小时,分离出有机溶剂后,加入25mL蒸馏水,之后用25mL乙酸乙酯萃取1次,分离出的有机层再依次用30mL水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水分别萃取1次(向有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和碳酸氢钠水溶液,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层)后,将分离出的有机层用3g的无水硫酸钠进行干燥,得到粗产物一,将粗产物一进行柱层析分离,得到具有式(II)的化合物;
[0030]
[0031] 步骤三、将57mg具有式(II)的化合物与0.026g 4-硝基邻苯二胺溶解在40mL无水四氢呋喃中,加入3mg对甲苯磺酸,然后在100℃下反应8h,待反应完成后,分离出有机溶剂,得到粗产物二,将粗产物二进行柱层析分离,即得具有式(III)的化合物。
[0032] 本发明制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的反应式为:
[0033]
[0034] 试剂条件:a.吡啶,(CH3CO)2O;b.Br2,C6H5I;c.O3,Me2S,Zn,HAc;d.13wt.%K2CO3,CH3OH;e.4-硝基邻苯二胺,THF,对甲苯磺酸。
[0035] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中检验反应完成的方法为:反应过程中用TLC跟踪反应,待原料点消失后,即为反应完成,所述步骤一中TLC跟踪反应以体积比为1:10的乙酸乙酯和石油醚为展开剂,所述步骤二和所述步骤三中TLC跟踪反应均以体积比为10:1的石油醚和乙醚为展开剂。
[0036] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中分离出有机溶剂的方法均为减压蒸馏。
[0037] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤二中将粗产物一进行柱层析分离以体积比为4:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂,所述步骤三中将粗产物二进行柱层析分离以体积比为2:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂。
[0038] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途,所述22-降-豆甾苯并咪唑化合物在制备治疗癌症药物制剂中的应用。
[0039] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途中,所述药物制剂为丸剂。
[0040] 实施例2
[0041] 本发明提供一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物,其结构式为式(III):
[0042]
[0043] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法,包括以下步骤:
[0044] 步骤一、将12.06g豆甾醇加入10mL吡啶中,完全溶解后,加入5mL醋酸酐,室温搅拌反应24h,待反应完成后停止反应,加入30mL浓度为1mol/L的稀盐酸后,将产物移入分液漏斗中,用15mL乙酸乙酯连续萃取3次(乙酸乙酯每次用量均为15mL,第一次加入乙酸乙酯后,溶液分层,分层后把有机层分出来,放在锥形瓶里,然后水层用乙酸乙酯继续萃取,水层中萃取完后,再分离出有机层,向水层中加入乙酸乙酯,再分离出有机层),合并有机层,接着向有机层中加入15mL水后,分离出有机层,再将分离出的有机层依次用10mL饱和Na2CO3水溶液、15mL水和20mL饱和食盐水进行萃取(向有机层中加入饱和Na2CO3水溶液后,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层),再将萃取后的有机层用7g无水硫酸钠进行干燥,之后过滤、分离出有机溶剂,得到具有式(I)的白色固体化合物;
[0045]
[0046] 步骤二、将2.2g具有式(I)的白色固体化合物置于充满氩气的双颈茄形反应瓶中,加进干燥的正己烷50mL,室温下搅拌使其完全溶解后,将温度降至-5℃,继续搅拌,另将602μL碘代苯和295μL溴素依次移入5mL正己烷中,充分混匀后冷却至-5℃,得到二溴碘苯溶液,然后将二溴碘苯溶液滴加进双颈茄形反应瓶中,滴加过程反应体系温度为-7℃,2.5小时加完后,继续搅拌1小时,将得到的反应液快速蒸干得到淡黄色油状物一,接着向淡黄色油状物一中加入30mL二氯甲烷使其完全溶解,之后移入带支管的反应烧瓶中,在液氮-乙酸乙酯冷浴中冷至-78℃,在搅拌下通入流量为2.5mL/min的臭氧30min,待反应完成后,加入2mL二甲硫醚,搅拌12h后,加入10mL冰醋酸和6.5g锌粉,在室温下继续搅拌4h,之后过滤,将滤液进行减压蒸馏,得到体积为滤液体积1/5的残液,考虑到残液含有大量乙酸,为了避免萃取过程中出现乳化状况,需要加大水相和有机相的极性差距,具体操作是:将残液用50mL饱和食盐水萃取1次,分离出有机层,分离出的有机层再用40mL体积比为3:1的乙酸乙酯和石油醚的混合液萃取1次,再分离出有机层,分离出的有机层依次用30mL水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水分别萃取1次(向有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和碳酸氢钠水溶液,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层),再将分离出的有机层进行减压蒸馏,得到淡黄色油状物二,之后向淡黄色油状物二中加入30mL甲醇和3mL质量分数为13%的碳酸钾水溶液,室温下搅拌0.5小时,分离出有机溶剂后,加入25mL蒸馏水,之后用25mL乙酸乙酯萃取1次,分离出的有机层再依次用30mL水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水分别萃取1次(向有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和碳酸氢钠水溶液,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层)后,将分离出的有机层用4g的无水硫酸钠进行干燥,得到粗产物一,将粗产物一进行柱层析分离,得到具有式(II)的化合物;IR(KBr)ν/cm-1:3378,2925,2896,2864,2704,2357,2332,1719,1540,1454,1433,1376,1057,1021,951;1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:0.671(s,3H,18-CH3),0.996(s,3H,19-CH3),3.486(m,1H,3-CαH),5.301(d,J=7.2Hz 1H,6-CH),9.502-9.558(H,m-CHO);13C NMR(75MHz,CDCl3)δ:12.8(18-C),
13.5(19-C),15.1(21-C),21.0(11-C),24.2(15-C),27.0(16-C),31.5(2-C),31.7(7-C),
31.9(8-C),36.5(10-C),37.2(1-C),38.4(20-C),39.4(12-C),42.2(4-C),42.9(13-C),
50.1(9-C),56.2(17-C),56.2(14-C),71.6(3-C),121.3(6-C),148.8(5-C),173.3(22-C).。
[0047]
[0048] 步骤三、将57mg具有式(II)的化合物与0.026g 4-硝基邻苯二胺溶解在40mL无水四氢呋喃中,加入5mg对甲苯磺酸,然后在100℃下反应8h,待反应完成后,分离出有机溶剂,得到粗产物二,将粗产物二进行柱层析分离,即得具有式(III)的化合物。IR(KBr)ν/cm-1:3409,2936,2960,1720,1460,1378,1049,792;1H NMR(300MHz,CDCl3)δ:0.70(3H,s,18-CH3),1.02(3H,d,J=4.2,21-CH3),1.03(3H,s,19-CH3),3.49-3.57(1H,m,C3-H),5.36(1H,d,J=3.6,C6-H),8.16-8.90(3H,Ph-H),9.60(1H,s,N-H);HREIMS(m/z):419.3096[M+H]+(calcd.for C28H39N2O:419.3062).。
[0049] 本发明制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的反应式为:
[0050]
[0051] 试剂条件:a.吡啶,(CH3CO)2O;b.Br2,C6H5I;c.O3,Me2S,Zn,HAc;d.13wt.%K2CO3,CH3OH;e.4-硝基邻苯二胺,THF,对甲苯磺酸。
[0052] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中检验反应完成的方法为:反应过程中用TLC跟踪反应,待原料点消失后,即为反应完成,所述步骤一中TLC跟踪反应以体积比为1:10的乙酸乙酯和石油醚为展开剂,所述步骤二和所述步骤三中TLC跟踪反应均以体积比为10:1的石油醚和乙醚为展开剂。
[0053] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中分离出有机溶剂的方法均为减压蒸馏。
[0054] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤二中将粗产物一进行柱层析分离以体积比为4:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂,所述步骤三中将粗产物二进行柱层析分离以体积比为2:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂。
[0055] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途,所述22-降-豆甾苯并咪唑化合物在制备治疗癌症药物制剂中的应用。
[0056] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途中,所述药物制剂为片剂。
[0057] 实施例3
[0058] 本发明提供一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物,其结构式为式(III):
[0059]
[0060] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法,包括以下步骤:
[0061] 步骤一、将12.06g豆甾醇加入10mL吡啶中,完全溶解后,加入5mL醋酸酐,室温搅拌反应24h,待反应完成后停止反应,加入30mL浓度为1mol/L的稀盐酸后,将产物移入分液漏斗中,用15mL乙酸乙酯连续萃取3次(乙酸乙酯每次用量均为15mL,第一次加入乙酸乙酯后,溶液分层,分层后把有机层分出来,放在锥形瓶里,然后水层用乙酸乙酯继续萃取,水层中萃取完后,再分离出有机层,向水层中加入乙酸乙酯,再分离出有机层),合并三次有机层,接着向有机层中加入15mL水后,分离出有机层,再将分离出的有机层依次用10mL饱和Na2CO3水溶液、15mL水和20mL饱和食盐水进行萃取(向有机层中加入饱和Na2CO3水溶液后,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层),再将萃取后的有机层用10g无水硫酸钠进行干燥,之后过滤、分离出有机溶剂,得到具有式(I)的白色固体化合物;
[0062]
[0063] 步骤二、将2.2g具有式(I)的白色固体化合物置于充满氩气的双颈茄形反应瓶中,加进干燥的正己烷50mL,室温下搅拌使其完全溶解后,将温度降至-5℃,继续搅拌,另将602μL碘代苯和295μL溴素依次移入5mL正己烷中,充分混匀后冷却至-5℃,得到二溴碘苯溶液,然后将二溴碘苯溶液滴加进双颈茄形反应瓶中,滴加过程反应体系温度为-10℃,2.5小时加完后,继续搅拌1小时,将得到的反应液快速蒸干得到淡黄色油状物一,接着向淡黄色油状物一中加入30mL二氯甲烷使其完全溶解,之后移入带支管的反应烧瓶中,在液氮-乙酸乙酯冷浴中冷至-78℃,在搅拌下通入流量为2.5mL/min的臭氧30min,待反应完成后,加入2mL二甲硫醚,搅拌12h后,加入10mL冰醋酸和6.5g锌粉,在室温下继续搅拌4h,之后过滤,将滤液进行减压蒸馏,得到体积为滤液体积1/5的残液,考虑到残液含有大量乙酸,为了避免萃取过程中出现乳化状况,需要加大水相和有机相的极性差距,具体操作是:将残液用50mL饱和食盐水萃取1次,分离出有机层,分离出的有机层再用40mL体积比为3:1的乙酸乙酯和石油醚的混合液萃取1次,再分离出有机层,分离出的有机层依次用30mL水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水分别萃取1次(向有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和碳酸氢钠水溶液,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层),再将分离出的有机层进行减压蒸馏,得到淡黄色油状物二,之后向淡黄色油状物二中加入30mL甲醇和3mL质量分数为13%的碳酸钾水溶液,室温下搅拌0.5小时,分离出有机溶剂后,加入25mL蒸馏水,之后用25mL乙酸乙酯萃取1次,分离出的有机层再依次用30mL水、饱和碳酸氢钠水溶液和饱和食盐水分别萃取1次(向有机层中加入水,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和碳酸氢钠水溶液,分离出有机层,再向分离出的有机层中加入饱和食盐水,分离出有机层)后,将分离出的有机层用5g的无水硫酸钠进行干燥,得到粗产物一,将粗产物一进行柱层析分离,得到具有式(II)的化合物;
[0064]
[0065] 步骤三、将57mg具有式(II)的化合物与0.026g 4-硝基邻苯二胺溶解在40mL无水四氢呋喃中,然后在100℃下反应8h,待反应完成后,分离出有机溶剂,得到粗产物二,将粗产物二进行柱层析分离,即得具有式(III)的化合物。
[0066] 本发明制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的反应式为:
[0067]
[0068] 试剂条件:a.吡啶,(CH3CO)2O;b.Br2,C6H5I;c.O3,Me2S,Zn,HAc;d.13wt.%K2CO3,CH3OH;e.4-硝基邻苯二胺,THF,对甲苯磺酸。
[0069] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中检验反应完成的方法为:反应过程中用TLC跟踪反应,待原料点消失后,即为反应完成,所述步骤一中TLC跟踪反应以体积比为1:10的乙酸乙酯和石油醚为展开剂,所述步骤二和所述步骤三中TLC跟踪反应均以体积比为10:1的石油醚和乙醚为展开剂。
[0070] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中分离出有机溶剂的方法均为减压蒸馏。
[0071] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤二中将粗产物一进行柱层析分离以体积比为4:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂,所述步骤三中将粗产物二进行柱层析分离以体积比为2:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂。
[0072] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途,所述22-降-豆甾苯并咪唑化合物在制备治疗癌症药物制剂中的应用。
[0073] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途中,所述药物制剂为注射剂。
[0074] 实施例4
[0075] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物,其结构式为式(III):
[0076]
[0077] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法,包括以下步骤:
[0078] 步骤一、将1g豆甾醇加入10mL吡啶中,完全溶解后,加入5mL醋酸酐,室温搅拌反应24h,待反应完成后停止反应,加入15mL浓度为1mol/L的稀盐酸后,将产物移入分液漏斗中,用10mL乙酸乙酯连续萃取3次,合并有机层,接着向有机层中加入10mL水后,分离出有机层,再将分离出的有机层依次用10mL饱和Na2CO3水溶液、10mL水和10mL饱和食盐水进行萃取,再将萃取后的有机层用5g无水硫酸钠进行干燥,之后过滤、分离出有机溶剂,得到具有式(I)的白色固体化合物;
[0079]
[0080] 步骤二、将1.5g具有式(I)的白色固体化合物置于充满氩气的双颈茄形反应瓶中,加进干燥的正己烷30mL,室温下搅拌使其完全溶解后,将温度降至-5℃,继续搅拌,另将600μL碘代苯和280μL溴素依次移入5mL正己烷中,充分混匀后冷却至-5℃,得到二溴碘苯溶液,然后将二溴碘苯溶液滴加进双颈茄形反应瓶中,滴加过程反应体系温度为-5℃,2小时加完后,继续搅拌1小时,将得到的反应液快速蒸干得到淡黄色油状物一,向淡黄色油状物一中加入20mL二氯甲烷使其完全溶解,之后移入带支管的反应烧瓶中,在液氮-乙酸乙酯冷浴中冷至-60℃,在搅拌下通入流量为2.5mL/min的臭氧30min,待反应完成后,加入2mL二甲硫醚,搅拌12h后,加入10mL冰醋酸和5g锌粉,在室温下继续搅拌2h,之后过滤,将滤液进行减压蒸馏,得到体积为滤液体积1/6的残液,之后将残液用30mL饱和食盐水萃取1次,分离出的有机层再用30mL体积比为3:1的乙酸乙酯和石油醚的混合液萃取1次,分离出的有机层再依次用20mL水、10mL饱和碳酸氢钠水溶液和10mL饱和食盐水分别萃取1次,再将分离出的有机层进行减压蒸馏,得到淡黄色油状物二,之后向淡黄色油状物二中加入20mL甲醇和3mL质量分数为13%的碳酸钾水溶液,室温下搅拌0.5小时,分离出有机溶剂后,加入10mL蒸馏水,之后用20mL乙酸乙酯萃取1次,分离出的有机层再依次用20mL水、10mL饱和碳酸氢钠水溶液和、10mL饱和食盐水分别萃取1次后,将分离出的有机层用3g的无水硫酸钠进行干燥,得到粗产物一,将粗产物一进行柱层析分离,得到具有式(II)的化合物;
[0081]
[0082] 步骤三、将50mg具有式(II)的化合物与20mg 4-硝基邻苯二胺溶解在30mL无水四氢呋喃中,加入3mg对甲苯磺酸,然后在60℃下反应2h,待反应完成后,分离出有机溶剂,得到粗产物二,将粗产物二进行柱层析分离,即得具有式(III)的化合物。
[0083] 本发明制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的反应式为:
[0084]
[0085] 试剂条件:a.吡啶,(CH3CO)2O;b.Br2,C6H5I;c.O3,Me2S,Zn,HAc;d.13wt.%K2CO3,CH3OH;e.4-硝基邻苯二胺,THF,对甲苯磺酸。
[0086] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中检验反应完成的方法为:反应过程中用TLC跟踪反应,待原料点消失后,即为反应完成,所述步骤一中TLC跟踪反应以体积比为1:10的乙酸乙酯和石油醚为展开剂,所述步骤二和所述步骤三中TLC跟踪反应均以体积比为10:1的石油醚和乙醚为展开剂。
[0087] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中分离出有机溶剂的方法均为减压蒸馏。
[0088] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤二中将粗产物一进行柱层析分离以体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂,所述步骤三中将粗产物二进行柱层析分离以体积比为5:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂。
[0089] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途,所述22-降-豆甾苯并咪唑化合物在制备治疗癌症药物制剂中的应用。
[0090] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途中,所述药物制剂为注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂。
[0091] 实施例5
[0092] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物,其结构式为式(III):
[0093]
[0094] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法,包括以下步骤:
[0095] 步骤一、将2g豆甾醇加入20mL吡啶中,完全溶解后,加入10mL醋酸酐,室温搅拌反应24h,待反应完成后停止反应,加入25mL浓度为1mol/L的稀盐酸后,将产物移入分液漏斗中,用20mL乙酸乙酯连续萃取3次,合并有机层,接着向有机层中加入20mL水后,分离出有机层,再将分离出的有机层依次用15mL饱和Na2CO3水溶液、20mL水和20mL饱和食盐水进行萃取,再将萃取后的有机层用10g无水硫酸钠进行干燥,之后过滤、分离出有机溶剂,得到具有式(I)的白色固体化合物;
[0096]
[0097] 步骤二、将2.5g具有式(I)的白色固体化合物置于充满氩气的双颈茄形反应瓶中,加进干燥的正己烷50mL,室温下搅拌使其完全溶解后,将温度降至-10℃,继续搅拌,另将800μL碘代苯和350μL溴素依次移入10mL正己烷中,充分混匀后冷却至-10℃,得到二溴碘苯溶液,然后将二溴碘苯溶液滴加进双颈茄形反应瓶中,滴加过程反应体系温度为-10℃,2-3小时加完后,继续搅拌2小时,将得到的反应液快速蒸干得到淡黄色油状物一,向淡黄色油状物一中加入30mL二氯甲烷使其完全溶解,之后移入带支管的反应烧瓶中,在液氮-乙酸乙酯冷浴中冷至-90℃,在搅拌下通入流量为3mL/min的臭氧40min,待反应完成后,加入5mL二甲硫醚,搅拌24h后,加入20mL冰醋酸和8g锌粉,在室温下继续搅拌5h,之后过滤,将滤液进行减压蒸馏,得到体积为滤液体积1/5的残液,之后将残液用50mL饱和食盐水萃取1次,分离出的有机层再用50mL体积比为3:1的乙酸乙酯和石油醚的混合液萃取1次,分离出的有机层再依次用30mL水、15mL饱和碳酸氢钠水溶液和15mL饱和食盐水分别萃取1次,再将分离出的有机层进行减压蒸馏,得到淡黄色油状物二,之后向淡黄色油状物二中加入25mL甲醇和5mL质量分数为13%的碳酸钾水溶液,室温下搅拌2小时,分离出有机溶剂后,加入20mL蒸馏水,之后用30mL乙酸乙酯萃取1次,分离出的有机层再依次用30mL水、20mL饱和碳酸氢钠水溶液和、20mL饱和食盐水分别萃取1次后,将分离出的有机层用5g的无水硫酸钠进行干燥,得到粗产物一,将粗产物一进行柱层析分离,得到具有式(II)的化合物;
[0098]
[0099] 步骤三、将100mg具有式(II)的化合物与40mg 4-硝基邻苯二胺溶解在40mL无水四氢呋喃中,加入5mg对甲苯磺酸,然后在80℃下反应2-6h,待反应完成后,分离出有机溶剂,得到粗产物二,将粗产物二进行柱层析分离,即得具有式(III)的化合物。
[0100] 本发明制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的反应式为:
[0101]
[0102] 试剂条件:a.吡啶,(CH3CO)2O;b.Br2,C6H5I;c.O3,Me2S,Zn,HAc;d.13wt.%K2CO3,CH3OH;e.4-硝基邻苯二胺,THF,对甲苯磺酸。
[0103] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中检验反应完成的方法为:反应过程中用TLC跟踪反应,待原料点消失后,即为反应完成,所述步骤一中TLC跟踪反应以体积比为1:5的乙酸乙酯和石油醚为展开剂,所述步骤二和所述步骤三中TLC跟踪反应均以体积比为5:1的石油醚和乙醚为展开剂。
[0104] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中分离出有机溶剂的方法均为减压蒸馏。
[0105] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤二中将粗产物一进行柱层析分离以体积比为3:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂,所述步骤三中将粗产物二进行柱层析分离以体积比为1:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂。
[0106] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途,所述22-降-豆甾苯并咪唑化合物在制备治疗癌症药物制剂中的应用。
[0107] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途中,所述药物制剂为注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂。
[0108] 实施例6
[0109] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物,其结构式为式(III):
[0110]
[0111] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法,包括以下步骤:
[0112] 步骤一、将2g豆甾醇加入15mL吡啶中,完全溶解后,加入7mL醋酸酐,室温搅拌反应24h,待反应完成后停止反应,加入20mL浓度为1mol/L的稀盐酸后,将产物移入分液漏斗中,用15mL乙酸乙酯连续萃取3次,合并有机层,接着向有机层中加入15mL水后,分离出有机层,再将分离出的有机层依次用12mL饱和Na2CO3水溶液、15mL水和15mL饱和食盐水进行萃取,再将萃取后的有机层用7g无水硫酸钠进行干燥,之后过滤、分离出有机溶剂,得到具有式(I)的白色固体化合物;
[0113]
[0114] 步骤二、将2g具有式(I)的白色固体化合物置于充满氩气的双颈茄形反应瓶中,加进干燥的正己烷40mL,室温下搅拌使其完全溶解后,将温度降至-7℃,继续搅拌,另将700μL碘代苯和315μL溴素依次移入7mL正己烷中,充分混匀后冷却至-7℃,得到二溴碘苯溶液,然后将二溴碘苯溶液滴加进双颈茄形反应瓶中,滴加过程反应体系温度为-7℃,2.5小时加完后,继续搅拌1.5小时,将得到的反应液快速蒸干得到淡黄色油状物一,向淡黄色油状物一中加入25mL二氯甲烷使其完全溶解,之后移入带支管的反应烧瓶中,在液氮-乙酸乙酯冷浴中冷至-75℃,在搅拌下通入流量为2.7mL/min的臭氧35min,待反应完成后,加入3mL二甲硫醚,搅拌18h后,加入15mL冰醋酸和6g锌粉,在室温下继续搅拌3h,之后过滤,将滤液进行减压蒸馏,得到体积为滤液体积1/5的残液,之后将残液用40mL饱和食盐水萃取1次,分离出的有机层再用40mL体积比为3:1的乙酸乙酯和石油醚的混合液萃取1次,分离出的有机层再依次用25mL水、12mL饱和碳酸氢钠水溶液和12mL饱和食盐水分别萃取1次,再将分离出的有机层进行减压蒸馏,得到淡黄色油状物二,之后向淡黄色油状物二中加入22mL甲醇和4mL质量分数为13%的碳酸钾水溶液,室温下搅拌0.5-2小时,分离出有机溶剂后,加入15mL蒸馏水,之后用25mL乙酸乙酯萃取1次,分离出的有机层再依次用25mL水、15mL饱和碳酸氢钠水溶液和、15mL饱和食盐水分别萃取1次后,将分离出的有机层用4g的无水硫酸钠进行干燥,得到粗产物一,将粗产物一进行柱层析分离,得到具有式(II)的化合物;
[0115]
[0116] 步骤三、将75mg具有式(II)的化合物与30mg 4-硝基邻苯二胺溶解在35mL无水四氢呋喃中,加入4mg对甲苯磺酸,然后在70℃下反应4h,待反应完成后,分离出有机溶剂,得到粗产物二,将粗产物二进行柱层析分离,即得具有式(III)的化合物。
[0117] 本发明制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的反应式为:
[0118]
[0119] 试剂条件:a.吡啶,(CH3CO)2O;b.Br2,C6H5I;c.O3,Me2S,Zn,HAc;d.13wt.%K2CO3,CH3OH;e.4-硝基邻苯二胺,THF,对甲苯磺酸。
[0120] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中检验反应完成的方法为:反应过程中用TLC跟踪反应,待原料点消失后,即为反应完成,所述步骤一中TLC跟踪反应以体积比为3:20的乙酸乙酯和石油醚为展开剂,所述步骤二和所述步骤三中TLC跟踪反应均以体积比为7:1的石油醚和乙醚为展开剂。
[0121] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤一、所述步骤二和所述步骤三中分离出有机溶剂的方法均为减压蒸馏。
[0122] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的制备方法中,所述步骤二中将粗产物一进行柱层析分离以体积比为4:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂,所述步骤三中将粗产物二进行柱层析分离以体积比为3:1的石油醚和乙酸乙酯为洗脱剂。
[0123] 一种22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途,所述22-降-豆甾苯并咪唑化合物在制备治疗癌症药物制剂中的应用。
[0124] 所述的22-降-豆甾苯并咪唑化合物的用途中,所述药物制剂为注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、悬浮剂或乳剂。
[0125] 试验1
[0126] 试验实施例3制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物对人宫颈癌细胞株(HeLa)、人乳头甲状腺癌细胞(TPC-1)和人口腔表皮样癌细胞株(KB)的细胞毒性,与正常细胞人肾上皮细胞(HEK293T)进行对比,采用MTT法,进行体外细胞毒性测定。在96孔板中培养的对数生长期细胞中加入不同浓度的实施例3制备的22-降-豆甾苯并咪唑化合物。培养72小时后,加入MTT,测定其吸光度,分别计算抑制肿瘤细胞生长增殖到50%时化合物的浓度,以IC50值表示,结果如表1所示:
[0127] 表1实施例3制备的化合物体外抗增殖活性(IC50,μmol/L)
[0128]细胞株 HeLa TPC-1 KB HEK293T
IC50 35.3±2.6 75.6±3.5 88.6±1.8 >200
[0129] 从表1可以看出,实施例3制备的化合物对所测试的三种肿瘤细胞均有一定的抑制效果,其中对Hela细胞的抑制效果最好,对正常细胞人肾上皮细胞(HEK293T)无毒性。
[0130] 尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。