[0022] 下面通过具体实施例,对本发明的技术方案作进一步的具体说明。
[0023] 本发明中,若非特指,所采用的原料和设备等均可从市场购得或是本领域常用的。下述实施例中的方法,如无特别说明,均为本领域的常规方法。
[0024] 总实施方案:
[0025] 一种基于菲律宾蛤仔粘附污泥的生态仿生型微生物絮凝剂,通过将菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液接种到液体培养基中培养后,自然沉降或离心分离出沉淀物,冻干后而得;所述液体培养基的配方为:葡萄糖10-25g/L,尿素0.2-0.8g/L,硫酸铵0.1-0.5g/L,酵母膏0.2-0.8g/L,磷酸氢二钾1.25-5g/L,磷酸二氢钾0.5-2g/L,载体50-90g/L,人工海水余量,调节pH为7.2-8。所述载体为沙土、泥沙、海沙、硅藻土、活性炭、贝壳粉中的一种或几种。
[0026] 人工海水配方:
[0027] 氯化钠NaCl 25.0 g/L
[0028] 氯化镁 MgCl2 2. 0 g/L
[0029] 硫酸镁 MgSO4 3.2 g/L
[0030] 氯化钙 CaCl2 1.2 g/L
[0031] 碳酸氢钠 NaHCO3 0.2 g/L
[0032] 氯化钾 KCl 0.7 g/L
[0033] 溴化钠 NaBr 0.06 g/L
[0034] 硼酸 H3BO3 0.06 g/L
[0035] 硅酸钠 Na2SiO3 0.0024 g/L
[0036] 磷酸 H3PO4 0.002 g/L
[0037] 六氯化二铝 Al2Cl6 0.013 g/L
[0038] 氨 NH3 0.002 g/L
[0039] 硝酸锂 LiNO3 0.0013 g/L
[0040] 蒸馏水余量
[0041] pH值:7.5-7.8。
[0042] 优选的实施方案如下:
[0043] 实施例1
[0044] 一种基于菲律宾蛤仔粘附污泥的生态仿生型微生物絮凝剂的制备方法,包括如下步骤:
[0045] (1)取五只原生态未经冲洗的菲律宾蛤仔(约7g/只)于装有100mL无菌海水的锥形瓶中进行冲洗,依次清洗三次且在第三次的培养瓶中直接静置吐泥24小时,从而获得菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液;
[0046] (2)提前用人工海水配制培养基:葡萄糖20g/L,尿素0.5g/L,硫酸铵0.2g/L,酵母膏0.5g/L,磷酸氢二钾(K2HPO4)5g/L,磷酸二氢钾(KH2PO4)2g/L,加土(沙土)量为70[0047] 沙土按70%海沙,30%土的重量比配制。
[0048] (3)将0.5mL的菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液接种到上述100mL培养基中;
[0049] (4)接种后的培养瓶放在温度为25℃,转速为140r/min的摇床培养箱中培养,培养时间为36h;
[0050] (5)摇床培养36h后,自然沉降或在离心机9000g的转速下分离出沉积物,取下层沉积物冻干,制成生态仿生型微生物絮凝剂。
[0051] 实施例2
[0052] 一种基于菲律宾蛤仔粘附性污泥的生态仿生型微生物絮凝剂的制备方法,包括如下步骤:
[0053] (1)取五只原生态未经冲洗的菲律宾蛤仔(约7g/只)于装有100mL无菌海水的锥形瓶中进行冲洗,依次清洗三次且在第三次的培养瓶中直接静置吐泥24小时,从而获得菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液;
[0054] (2)提前用陈海水配制培养基:葡萄糖15g/L,尿素0.5g/L,硫酸铵0.2g/L,酵母膏0.5g/L,磷酸氢二钾(K2HPO4)5g/L,磷酸二氢钾(KH2PO4)2g/
[0055] (3)将0.5mL的菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液接种到上述100mL培养基中;
[0056] (4)接种后的培养瓶放在温度为25℃,转速为180r/min的摇床培养箱中培养,培养时间为36h;
[0057] (5)摇床培养36h后,自然沉降或在离心机9000g的转速下分离出沉积物,取下层沉积物冻干,制成生态仿生型微生物絮凝剂。
[0058] 实施例3
[0059] 一种基于菲律宾蛤仔粘附污泥的生态仿生型微生物絮凝剂的制备方法,包括如下步骤:
[0060] (1)取五只原生态未经冲洗的菲律宾蛤仔(约7g/只)于装有100mL无菌海水的锥形瓶中进行冲洗,依次清洗三次且在第三次的培养瓶中直接静置吐泥24小时,从而获得菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液;
[0061] (2)提前用陈海水配制培养基:葡萄糖20g/L,尿素0.5g/L,硫酸铵0.2g/L,酵母膏0.5g/L,磷酸氢二钾(K2HPO4)2.5g/L,磷酸二氢钾(KH2PO4)1g/L,加土(沙土)量为70g/L,pH调为7.5;
[0062] (3)将0.5mL的菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液接种到上述100mL培养基中;
[0063] (4)接种后的培养瓶放在温度为25℃,转速为180r/min的摇床培养箱中培养,培养时间为36h;
[0064] (5)摇床培养36h后,自然沉降或在离心机9000g的转速下分离出沉积物,取下层沉积物冻干,制成生态仿生型微生物絮凝剂。
[0065] 实施例4
[0066] 一种基于菲律宾蛤仔粘附污泥的生态仿生型微生物絮凝剂的制备方法,包括如下步骤:
[0067] (1)取五只原生态未经冲洗的菲律宾蛤仔(约7g/只)于装有100mL无菌海水的锥形瓶中进行冲洗,依次清洗三次,在第三次清洗的培养瓶中直接静置吐泥24小时,从而获得菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液;
[0068] (2)提前用陈海水配制培养基:葡萄糖15g/L,尿素0.5g/L,硫酸铵0.2g/L,酵母膏0.5g/L,磷酸氢二钾(K2HPO4)5g/L,磷酸二氢钾(KH2PO4)2g/L,加土(沙土)量为70g/L,pH调为7.5;
[0069] (3)将0.5mL的菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液接种到上述100mL培养基中;
[0070] (4)接种后的培养瓶放在温度为25℃,转速为180r/min的摇床培养箱中培养,培养时间为36h;
[0071] (5)每培养36h为一代,通过接种本代培养出的悬浊液0.5mL到下一代的同样规格的液体培养基中,可实现连续传代培养,进行连续生产;
[0072] (6)摇床培养每36h,自然沉降或在离心机9000g的转速下分离出沉积物,取下层沉积物冻干,制成生态仿生型微生物絮凝剂。
[0073] 絮凝活性的测定步骤如下:1)量取高岭土悬浊液(4g/L)95mL(边加边搅拌,充分混合均匀);2)倒入烧杯中,加5mL的1%氯化钙溶液,用氢氧化钠溶液调pH至7.5;3)加入沉积物样品1g;4)快速搅拌1min,然后再缓慢搅拌2min;4)静置10min后,取距离液面3mL在分光光度计的550nm处比色;5)计算得出絮凝率。
[0074] 培养基成分为:葡萄糖15g/L,尿素0.5g/L,硫酸铵0.2g/L,酵母膏0.5g/L,磷酸氢二钾(K2HPO4)2.5g/L,磷酸二氢钾(KH2PO4)1g/L,陈海水配制,加土(沙土)量为7g/100mL ,pH调为7.5。培养条件:温度为25℃,转速为180r/min,菲律宾蛤仔吐的污泥悬浊液接种量为5‰,培养时间为36h。在上述的培养基成分和培养条件下,冷冻干燥得到生态仿生型微生物絮凝剂的絮凝率最高,它的絮凝率可达到73.62%。连续培养十代,每代的絮凝率都在50%以上。
[0075] 以上所述的实施例只是本发明的一种较佳的方案,并非对本发明作任何形式上的限制,在不超出权利要求所记载的技术方案的前提下还有其它的变体及改型。