一种文昌鱼繁殖季节多次重复排精排卵的人工调控方法   0    0

本发明涉及一种文昌鱼繁殖季节多次重复排精排卵的人工调控方法。所述的是：分别选取4～5龄雄性和雌性佛罗里达文昌鱼，按照10～18尾雄性亲鱼比10尾雌性亲鱼的比例，置于孵化缸中强化培育，直至观察亲鱼开始第一次排精排卵；将第一次排精排卵后的亲鱼转移至复壮培育池中进行产后复壮培育，直至观察亲鱼出现第二次排精排卵；不断重复上述方法和培育条件，直至观察亲鱼开始第四次、第五次、第六次、第七次、第八次、第九次、第十次排精排卵。采用本发明所述的方法，文昌鱼排精排卵频次高，受精率达到55～67%，10～12h的孵化出苗率达90～93%，5天成活率达到70～75%，为文昌鱼规模化人工繁殖提供充足的鱼苗。

1.一种文昌鱼繁殖季节多次重复排精排卵的人工调控方法,其特征在于：
1）亲鱼选择
分别选取部分4～5龄雄性和雌性的佛罗里达文昌鱼(Branc jiosttoma. floridae)作为亲鱼备用；
2）第一次排精排卵
按照10～18尾雄性亲鱼比10尾雌性亲鱼的比例，置于盛满海水、底部铺垫5～10cm厚细沙的孵化缸中，采用微水流循环和人工控光进行产前鱼体强化培育，强化培育过程每天2次等量投喂强化单细胞藻混合藻，每次投喂的强化单细胞藻混合藻量为每立方海水0.5～0.6万个强化单细胞藻混合藻，待亲鱼性腺饱满发育在Ⅴ期，每天下午16：00观察亲鱼是否有排精排卵行为，直至观察亲鱼开始第一次排精排卵；
3）复壮培育与第二次排精排卵
 将第一次排精排卵后的亲鱼转移至盛满海水的复壮培育池中采用微水流循环和人工控光进行产后鱼体复壮和性腺成熟培育，复壮培育过程每天2次定时投喂等量的复壮单细胞藻混和藻，每次投喂复壮单细胞藻混合藻量为每立方海水0.5～0.6万个复壮单细胞藻混合藻；复壮培育过程中所述的定时投喂、人工控光、海水水温、海水盐度与海水pH值与步骤
2)相同，待亲鱼性腺饱满发育在Ⅴ期，每天16：00观察亲鱼是否有排精排卵行为，直至观察亲鱼出现第二次排精排卵；
第二次排精排卵结束，将亲鱼转移至下一个复壮培育池中进行重复的复壮培育；不断重复步骤3）的方法和培育条件，直至观察亲鱼开始第四次、第五次、第六次、第七次、第八次、第九次、第十次排精排卵；
所述的强化单细胞藻混合藻，按以下藻种重量份比例混合得到：
亚心形扁藻                  40～60
湛江等鞭金藻               15～20
小球藻                      5～10
牟氏角毛藻                  10～15
塔胞藻                      10～15；
所述的强化单细胞藻混合藻为亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis）、湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis)、小球藻(Chlorella vulgaris)、牟氏角毛藻（Chaetoceros muelleri）和塔胞藻（Pyramimonas sp.）组成，均来自福建师范大学生命科学学院藻类研究室以人工培养单细胞藻方式进行品质改良得到；
所述的复壮单细胞藻混合藻，按以下藻种重量份比例混合得到：
亚心形扁藻                  20～25
湛江等鞭金藻               25～30
牟氏角毛藻                  10～15
小球藻                      30～35；
所述的步骤2）孵化缸中海水，海水水温在24℃～27℃之间，海水盐度在28～33‰，海水pH控制在8～9之间；
所述的步骤2）中每天2次等量投喂，第一次在每天上午8:00‑9:00点定时投喂强化单细胞藻混合藻，第二次在每天下午16:00‑17:00点定时投喂强化单细胞藻混合藻；
所述的人工控光，其光照量08:30‑18:30之间为10Dark ，18:30‑ 08:30为14Light；
所述微水流循环是加强微水流循环流动，微水流循环流速为1L/h，其过程是：高位蓄水池依靠水位差将海水通过橡皮管流入中位的孵化缸或复壮培育池的进水口,海水经孵化缸或复壮培育池的出水口流入低位蓄水池，低位蓄水池中海水由微型水泵抽回高位蓄水池进行循环使用。

2.根据权利要求1 所述的一种文昌鱼繁殖季节多次重复排精排卵的人工调控方法，其特征在于所述的人工培养单细胞藻进行品质改良，是通过采用自行配制的改良培养基培养得到；
所述的改良培养基，配方如下:
（NH4）2SO4                                       200mg
海泥抽出液                                     20ml
过磷酸钙[Ca(H2PO4)2·H2O+2(CaSO4·H2O)]         30mg
FeC6H5O7(1%溶液)                                0.5ml
维生素溶液                                     20ml
海水                                           1000ml。

3.根据权利要求2所述的一种文昌鱼繁殖季节多次重复排精排卵的人工调控方法，其特征在于所述的海泥抽出液:取海滩上砂质较少，有机质较多而又不是过分淤黑的上层软泥，清除其中的小树枝和小石块杂物，以容量计算1份泥加2份水，充分搅拌均匀，静置l～
2min，待粗砂、小石下沉，把上层泥浆倾人铝锅中，弃去底部粗砂、小石杂物，按每1000ml泥浆加入NaOH 1g的量加入NaOH，煮沸20～30min，煮时需不断搅拌，煮后静置24h，吸取上清液使用。

4.根据权利要求2所述的一种文昌鱼繁殖季节多次重复排精排卵的人工调控方法，其特征在于所述的维生素溶液: 维生素B1 0.1g 、维生素B12 0.5g 、生物素 0.5g 、海水1L配成维生素溶液。

5.根据权利要求2所述的一种文昌鱼繁殖季节多次重复排精排卵的人工调控方法，其特征在于所述的海水，是指取自近海的普通海水经0.4m孔径滤膜过滤后得到的海水。