[0033] 下面结合实施例对本发明作进一步描述,但本发明的保护范围不仅仅局限于实施例。
[0034] 实施例1
[0035] 一种香港四照花组织培养培养基,包括初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基。所述初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均以母培养基为基本培养基,并都添加有植物生长调节剂、以及蔗糖20000 mg/L、卡拉胶6500mg/L。
[0036] 初代培养培养基中的母培养基组成为:
[0037] 大量元素:硝酸钾3600mg/L、硝酸铵3000mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L。
[0038] 微量元素:碘化钾0.8mg/L、四水硫酸锰22.5mg/L、七水硫酸锌8.6mg/L、硼酸6mg/L、五水硫酸铜0.025mg/L、氯化钴0.025mg/L、二水钼酸钠0.25mg/L;
[0039] 铁盐:七水硫酸亚铁27.5mg/L、乙二胺四乙酸二钠37.5mg/L;
[0040] 有机成分:盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆辛0.5mg/L、烟酸0.5mg/L、甘氨酸2mg/L、肌醇100mg/L。
[0041] 继代增殖培养基和壮苗培养基中大量元素的组成为:硝酸钾1800mg/L、硝酸铵1500mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙440mg/L。
[0042] 生根培养基中大量元素的组成为:硝酸钾1800mg/L、硝酸铵1500mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾160mg/L、二水氯化钙240mg/L。
[0043] 继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基中的微量元素、铁盐和有机成分与初代培养基中的相同。
[0044] 初代培养培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 3.2mg/L、NAA 0.15mg/L。
[0045] 继代增殖培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 2.5mg/L、NAA 0.061mg/L。
[0046] 壮苗培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 1.5mg/L、NAA 0.2mg/L。
[0047] 生根培养基中的植物生长调节剂包括:IBA 0.5mg/L、NAA 0.2mg/L。
[0048] 实施例2
[0049] 一种香港四照花组织培养培养基,包括初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基。所述初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均以母培养基为基本培养基,并都添加有植物生长调节剂、以及蔗糖25000 mg/L、卡拉胶6000mg/L。
[0050] 初代培养培养基中的母培养基组成为:
[0051] 大量元素:硝酸钾1600mg/L、硝酸铵1400mg/L、七水硫酸镁300mg/L、磷酸二氢钾150mg/L、二水氯化钙200mg/L;
[0052] 微量元素:碘化钾0.8mg/L、四水硫酸锰20mg/L、七水硫酸锌8mg/L、硼酸6mg/L、五水硫酸铜0.02mg/L、氯化钴0.02mg/L、二水钼酸钠0.2mg/L;
[0053] 铁盐:七水硫酸亚铁25mg/L、乙二胺四乙酸二钠35mg/L;
[0054] 有机成分:盐酸硫胺素0.1mg/L、盐酸吡哆辛0.4mg/L、烟酸0.4mg/L、甘氨酸1mg/L、肌醇100mg/L。
[0055] 继代增殖培养基和壮苗培养基中大量元素的组成为:硝酸钾2000mg/L、硝酸铵1400mg/L、七水硫酸镁340mg/L、磷酸二氢钾180mg/L、二水氯化钙480mg/L。
[0056] 生根培养基中大量元素的组成为:硝酸钾2000mg/L、硝酸铵2000mg/L、七水硫酸镁340mg/L、磷酸二氢钾180mg/L、二水氯化钙200mg/L。
[0057] 继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基中的微量元素、铁盐和有机成分与初代培养基中的相同。
[0058] 初代培养培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 3mg/L、NAA 0.1mg/L。
[0059] 继代增殖培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 2mg/L、NAA 0.06mg/L。
[0060] 壮苗培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 1mg/L、NAA 0.1mg/L。
[0061] 生根培养基中的植物生长调节剂包括:IBA 0.2mg/L、NAA 0.1mg/L。
[0062] 实施例3
[0063] 一种香港四照花组织培养培养基,包括初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基。所述初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均以母培养基为基本培养基,并都添加有植物生长调节剂、以及蔗糖35000 mg/L、卡拉胶7000mg/L。
[0064] 初代培养培养基中的母培养基组成为:
[0065] 大量元素:硝酸钾4000mg/L、硝酸铵3200mg/L、七水硫酸镁340mg/L、磷酸二氢钾180mg/L、二水氯化钙480mg/L;
[0066] 微量元素:碘化钾1mg/L、四水硫酸锰25mg/L、七水硫酸锌10mg/L、硼酸7mg/L、五水硫酸铜0.03mg/L、氯化钴0.03mg/L、二水钼酸钠0.3mg/L;
[0067] 铁盐:七水硫酸亚铁30mg/L、乙二胺四乙酸二钠40mg/L;
[0068] 有机成分:盐酸硫胺素0.3mg/L、盐酸吡哆辛0.8mg/L、烟酸0.8mg/L、甘氨酸3mg/L、肌醇130mg/L。
[0069] 继代增殖培养基和壮苗培养基中大量元素的组成为:硝酸钾3500mg/L、硝酸铵3000mg/L、七水硫酸镁340mg/L、磷酸二氢钾180mg/L、二水氯化钙480mg/L。
[0070] 生根培养基中大量元素的组成为:硝酸钾3000mg/L、硝酸铵2500mg/L、七水硫酸镁340mg/L、磷酸二氢钾180mg/L、二水氯化钙200mg/L。
[0071] 继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基中的微量元素、铁盐和有机成分与初代培养基中的相同。
[0072] 初代培养培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 4mg/L、NAA 0.2mg/L。
[0073] 继代增殖培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 3mg/L、NAA 0.12mg/L。
[0074] 壮苗培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 2mg/L、NAA 0.3mg/L。
[0075] 生根培养基中的植物生长调节剂包括:IBA 1mg/L、NAA 0.3mg/L。
[0076] 实施例4
[0077] 一种香港四照花组织培养培养基,包括初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基。所述初代培养培养基、继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基均以母培养基为基本培养基,并都添加有植物生长调节剂、以及蔗糖30000 mg/L、卡拉胶6800mg/L。
[0078] 初代培养培养基中的母培养基组成为:
[0079] 大量元素:硝酸钾2800mg/L、硝酸铵2300mg/L、七水硫酸镁330mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、二水氯化钙460mg/L;
[0080] 微量元素:碘化钾0.9mg/L、四水硫酸锰24mg/L、七水硫酸锌9mg/L、硼酸6.8mg/L、五水硫酸铜0.03mg/L、氯化钴0.03mg/L、二水钼酸钠0.28mg/L;
[0081] 铁盐:七水硫酸亚铁28mg/L、乙二胺四乙酸二钠38mg/L;
[0082] 有机成分:盐酸硫胺素0.25mg/L、盐酸吡哆辛0.87mg/L、烟酸0.7mg/L、甘氨酸2.5mg/L、肌醇120mg/L。
[0083] 继代增殖培养基和壮苗培养基中大量元素的组成为:硝酸钾2500mg/L、硝酸铵2000mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、二水氯化钙440mg/L。
[0084] 生根培养基中大量元素的组成为:硝酸钾2500mg/L、硝酸铵2000mg/L、七水硫酸镁320mg/L、磷酸二氢钾170mg/L、二水氯化钙220mg/L。
[0085] 继代增殖培养基、壮苗培养基和生根培养基中的微量元素、铁盐和有机成分与初代培养基中的相同。
[0086] 初代培养培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA3.4mg/L、NAA 0.25mg/L。
[0087] 继代增殖培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 2.5mg/L、NAA 0.08mg/L。
[0088] 壮苗培养基中的植物生长调节剂包括:6-BA 0.5mg/L、NAA 0.25mg/L。
[0089] 生根培养基中的植物生长调节剂包括:IBA 0.6mg/L、NAA 0.2mg/L。
[0090] 选取生长较整齐的香港四照花茎段,冲洗干净后分别选用实施例1-4的培养基进行培养,每组试验培养20瓶,每瓶5个,光照时间、光照强度、温度控制等培养参数完全一致,45天后观察并统计茎段发芽生长情况,如下表1所示
[0091] 表1 香港四照花芽的生长情况
[0092] 诱导芽个数 生长状态
实施例1 82 芽浓绿,生长较快
实施例2 86 芽浓绿,生长快
实施例3 88 芽浓绿,生长快
实施例4 84 芽浓绿,生长快
[0093] 由表1可知,通过初代培养培养基,诱导芽个数多,芽的生长状态好。
[0094] 将诱导出来的健康小芽转入继代增殖培养基中进行增殖培养,增殖培养周期为35天,增殖培养后统计并测量增殖系数和生长高度,增殖系数=瓶苗在一个周期内形成的有效苗数/接种苗数,如下表2所示:
[0095] 表2 香港四照花芽的增殖培养情况
[0096]
[0097] 由表2可知,通过增殖培养基培养后,香港四照花在增殖过程中生长良好,增殖系数很生长高度值都很高。
[0098] 将增殖培养基中培养后的芽在壮苗培养基中培养后,继续接种到生根培养基中进行生根培养,培养30天后查看并计算生根率和平均根长,其中生根率=生根的外植体数/接种的外植体数×100%,平均根长=根的总长度/根的总
[0099] 数;结果如下表3所示,
[0100] 表3 香港四照花芽的生根培养情况
[0101]
[0102] 由表3可知,通过生根培养基的培养,香港四照花的芽生根率高,根长,体现出了良好的生长特性。
[0103] 综上所述,通过本发明的培养基能大大提高增殖系数和生根率,易于短期内大量规模化生产,繁殖效率高。