一种苯并(c)吖啶衍生物及其制备方法和用途   0    0

[0001] 本发明涉及医药技术领域，特别涉及抗肿瘤药物技术领域，尤其涉及一种苯并(c)吖啶衍生物及其制备方法和用途。

[0002] 肿瘤仍是当今世界直接危及人类生命的一种最常见、最严重的疾病。据不完全统计，全世界每年约有700万人新患癌症，每年约有500多万人死于癌症。随着人们对生物化学、免疫学、治疗学等领域的研究，以及对肿瘤基因水平的认识和在生物学领域与技术方面的新进展，药学家和肿瘤学家越来越深刻地意识到，必须从肿瘤发生发展的机制入手，才能提高疗效，取得突破性进展。DNA在抗肿瘤药物的开发过程中是一种较为理想的生物靶标，而DNA嵌入剂能够较好的嵌入双螺旋的DNA碱基对中间，这就为设计DNA靶向抗肿瘤药物提供了基础。而具有平面刚性结构的发色团分子常作为DNA靶向分子在抗肿瘤药物的设计和体外筛选方面发挥重要作用。吖啶是一类受到广泛关注的含氮有机杂环化合物，因其结构为大环共轭体系，具刚性平面结构，可作为DNA等大分子的嵌入体，在抗肿瘤、抗病毒、抗疟疾、抗菌、生物荧光探针和治疗艾滋病等方面均表现出很强的生理活性，本发明人在申请号为：201410521970.6的专利申请文件中公开了一种吖啶酰胺基硫脲类衍生物及其制备方法和用途，以吖啶为母体，合成吖啶酰胺基硫脲类衍生物具有抗癌活性，但是抗癌活性相对较弱。在这基础上本发明人通过研究发现用苯并吖啶作为母体比吖啶的活性强很多，同时通过在苯并(c)吖啶环的7-位上连接活性基团酰胺基硫脲结构，合成新型苯并(c)吖啶衍生物，活性叠加，抗癌活性比吖啶酰胺基硫脲类衍生物大大增强，本发明的创新之处在于通过在苯并(c)吖啶环的7-位上连接活性基团酰胺基硫脲结构，合成新型苯并(c)吖啶衍生物，该衍生物目前尚未有报道。

[0003] 本发明的目的在于克服以上不足，并且填补研究的空白，提供一种苯并(c)吖啶衍生物，本发明用苯并吖啶作为母环比吖啶的活性强很多，同时通过在苯并(c)吖啶环的7-位上连接活性基团酰胺基硫脲结构，合成新型苯并(c)吖啶衍生物，活性叠加，抗癌活性比吖啶酰胺基硫脲类衍生物大大增强。

[0004] 本发明的另一个目的提供一种苯并(c)吖啶衍生物制备方法。

[0005] 本发明提供的技术方案为：

[0006] 一种苯并(c)吖啶衍生物，其具有结构式：

[0007]

[0008] 分子式：C25H18N4OS

[0009] 相对分子量：422.12

[0010] 理化性质：橙黄色粉末固体，沸点：182-186℃；1H NMR(DMSO-d6，400M Hz)，δ：11.18(br，s，1H，-NH)，10.58(br，s，1H，-NH)，10.27(br，s，1H，-NH)，9.40(s，1H，ArH)，9.38(d，1H，J＝8.5，ArH)，8.32(d，1H，J＝8.5，ArH)，8.25(s，1H，ArH)，8.09(d，2H，J＝7.2，ArH)，8.03(d，1H，J＝7.2，ArH)，7.90-8.00(m，2H，ArH)，7.81-7.83(m，2H，ArH)，7.73(d，1H，J＝7.2，ArH)，7.59(d，1H，J＝7.2，ArH)，7.51-7.60(m，2H，ArH)；13C NMR(DMSO-d6，100MHz)，δ183.51，166.82，147.98，147.86，142.39，133.90，132.93，132.44，131.26，130.59，129.92，
129.75，128.71，128.61，127.93，126.64，125.43，123.26，122.74。

[0011] 一种苯并(c)吖啶衍生物的制备方法，所述苯并(c)吖啶衍生物的合成路线如下：

[0012]

[0013] 所述苯并(c)吖啶衍生物的制备方法包括以下步骤：

[0014] 1)以邻溴苯甲酸和萘胺为原料，碳酸钾和铜粉为催化剂，加入正戊醇作为溶剂，经乌尔曼反应得到化合物N-萘基邻氨基苯甲酸①；

[0015] 2)所述化合物N-萘基邻氨基苯甲酸①以三氯氧磷关环，制得化合物7-氯苯并(c)吖啶②；

[0016] 3)所述化合物7-氯苯并(c)吖啶②在相转移催化剂苄基三乙基氯化铵和三辛基甲基氯化铵作用下，与硫氰化钠发生亲核取代反应制得7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③；

[0017] 4)将7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③溶于无水乙醇后加入苯甲酰肼，回流反应，反应过程中橙黄色粉末固体析出，抽滤后即得目标产物7-苯并(c)吖啶酰胺基硫脲④。

[0018] 本发明的另一个目的是提供一种所述的苯并(c)吖啶衍生物在制备抗肿瘤药物中应用。

[0019] 进一步地，所述苯并(c)吖啶类衍生物与药学可接受的辅料组合制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂。

[0020] 进一步地，所述辅料为乙醇、丙二醇、聚乙二醇、二甘醇、三乙酸甘油酯、甘油、糊精、聚维酮、十八醇、硬脂酸、微晶纤维素、淀粉、乳糖、甘露醇、碳酸氢钠、碳酸钙、低取代羟丙基甲基纤维素、硬脂酸镁、滑石粉中的几种，与辅料组合制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂使用后利于人体吸收，使得药效充分发挥，并且方便使用。

[0021] 本发明用苯并吖啶作为母环比吖啶的活性强很多，同时通过在苯并(c)吖啶环的7-位上连接活性基团酰胺基硫脲结构，合成新型苯并(c)吖啶衍生物，活性叠加，抗癌活性比吖啶酰胺基硫脲类衍生物大大增强，该化合物7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲，经体外抗肿瘤实验表明，该化合物具有强的抗肿瘤活性，本发明所采用的制备化合物7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲的方法，使得目标产物7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲的产率比原先的制备方法大大提高，同时7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲的纯度也增高了，而且制备方法简单易于操作，反应时间短，在制备抗肿瘤药物中应用，与药学可接受的辅料组合制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂。

[0024] 结合下面实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

[0025] 实施例1

[0026] 一种苯并(c)吖啶衍生物，其具有结构式：

[0027]

[0028] 所述苯并(c)吖啶衍生物的合成路线如下：

[0029]

[0030] 7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲④的制备，其具体步骤如下：

[0031] 以下原料按重量份数计：

[0032] 1)在三颈瓶中，加入12份邻溴苯甲酸、8份萘胺、13份碳酸钾和0.9份铜粉，加入65份正戊醇作为溶剂，100℃反应1小时后，减压除去正戊醇后，再加入400份水，温度为60℃反应20分钟，过滤后用水洗涤滤饼，收集洗涤后的水与滤液合并，用浓盐酸酸化至PH值为2，析出大量紫黑色沉淀，抽滤，所得黑色固体用丙酮重结晶，干燥后得到N-萘基邻氨基苯甲酸①，正戊醇作为溶剂能很好的溶解邻溴苯甲酸和萘胺，从而提高了反应产物的产率；

[0033] 2)在圆底烧瓶中，加入上述得到的20份N-萘基邻氨基苯甲酸①及7份三氯氧磷，在8分钟内将反应物的温度加热至80℃，反应物沸腾反应，待沸腾趋缓，将温度升高至120℃，反应2小时后，冷却至室温，将圆底烧瓶中的物质缓慢倾入浓氨水、碎冰和氯仿的混合物中，其中待固体完全溶解，静止后分离出氯仿层，水层再用氯仿萃取2次，合并氯仿萃取液，用无水氯化钙干燥12小时后，过滤，蒸除溶剂，得到7-氯苯并(c)吖啶②；

[0034] 3)在圆底烧瓶中，加入4份7-氯苯并(c)吖啶②及120份丙酮，回流溶解后加入3份硫氰化钠、0.05份苄基三乙基氯化铵和0.05份三辛基甲基氯化铵，反应2.5h后，有黄色固体粉末析出，抽滤，水洗涤后得到7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③，其中苄基三乙基氯化铵和三辛基甲基氯化铵作为相催化剂，大大提高的反应速率，缩短了反应时间，产物7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯纯度增加；

[0035] 4)在圆底烧瓶中，加入6份7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③及50份乙醇，后加入7份苯甲酰肼，回流反应2h，反应过程中有大量固体析出，冷却抽滤得橙黄色固体即为7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲④，通过步骤3得到的纯度高7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯作为反应物从而使得最终产物7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲的纯度也相应提高，将7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲。

[0036] 可将步骤4)得到的其中1份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与5份乙醇、2份丙二醇、2份聚乙二醇组合制成注射剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与1份二甘醇、1份三乙酸甘油酯、1份甘油、3份碳酸钙、1份低取代羟丙基甲基纤维素、0.5份硬脂酸镁、0.2份滑石粉、3份淀粉组合制成片剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与1份甘油、2份糊精、0.5份聚维酮、1.5份十八醇、0.5份硬脂酸、0.1份微晶纤维素、1份乳糖组合制成丸剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与0.5份甘露醇、1份碳酸氢钠、0.5份碳酸钙、
2份低取代羟丙基甲基纤维素、1份硬脂酸镁、0.5滑石粉组合制成胶囊；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与2份乙醇、1份丙二醇、1份聚乙二醇、0.5份碳酸钙、0.5份低取代羟丙基甲基纤维素、1份硬脂酸镁组合制成悬浮剂；将其中1份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与2份乙醇、2份丙二醇、1份聚乙二醇、0.5份甘油、1份糊精、0.5份淀粉、0.2份乳糖组合制成乳剂，与辅料组合制成注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂使用后利于人体吸收，使得药效充分发挥，并且方便使用。

[0037] 实施例1所得到的7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲经过核磁共振氢谱分析如图1所示得到以下数据：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)，δ：11.18(br，s，1H，-NH)，10.58(br，s，1H，-NH)，10.27(br，s，1H，-NH)，9.40(s，1H，ArH)，9.38(d，1H，J＝8.5，ArH)，8.32(d，IH，J＝8.5，ArH)，8.25(s，1H，ArH)，8.09(d，2H，J＝7.2，ArH)，8.03(d，1H，J＝7.2，ArH)，7.90-8.00(m，
2H，ArH)，7.81-7.83(m，2H，ArH)，7.73(d，1H，J＝7.2，ArH)，7.59(d，1H，J＝7.2，ArH)，7.51-
7.60(m，2H，ArH)；

[0038] 实施例1所得到的7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲经过核磁共振碳谱分析如图2所13 6
示得到以下数据：C NMR(DMSO-d ，100MHz)，δ183.51，166.82，147.98，147.86，142.39，
133.90，132.93，132.44，131.26，130.59，129.92，129.75，128.71，128.61，127.93，126.64，
125.43，123.26，122.74。

[0039] 实施例2

[0040] 一种苯并(c)吖啶衍生物，其具有结构式：

[0041]

[0042] 所述苯并(c)吖啶衍生物的合成路线如下：

[0043]

[0044] 7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲④的制备，其具体步骤如下：

[0045] 以下原料按重量份数计：

[0046] 1)在三颈瓶中，加入20份邻溴苯甲酸、12份萘胺、10份碳酸钾和1.0份铜粉，加入150份正戊醇作为溶剂，105℃反应1.5小时后，减压除去正戊醇后，再加入1000份水，温度为
100℃反应10分钟，过滤后用水洗涤滤饼，收集洗涤后的水与滤液合并，用浓盐酸酸化至PH值为1.5，析出大量紫黑色沉淀，抽滤，所得黑色固体用丙酮重结晶，干燥后得到N-萘基邻氨基苯甲酸①，正戊醇作为溶剂能很好的溶解邻溴苯甲酸和萘胺，从而提高了反应产物的产率；

[0047] 2)在圆底烧瓶中，加入上述得到的30份N-萘基邻氨基苯甲酸①及18份三氯氧磷，在20分钟内将反应物的温度加热至90℃，反应物沸腾反应，待沸腾趋缓，将温度升高至160℃，反应1.5小时后，冷却至室温，将圆底烧瓶中的物质缓慢倾入浓氨水、碎冰和氯仿的混合物中，其中待固体完全溶解，静止后分离出氯仿层，水层再用氯仿萃取3次，合并氯仿萃取液，用无水氯化钙干燥8小时后，过滤，蒸除溶剂，得到7-氯苯并(c)吖啶②；

[0048] 3)在圆底烧瓶中，加入10份7-氯苯并(c)吖啶②及60份丙酮，回流溶解后加入5份硫氰化钠、0.03份苄基三乙基氯化铵和0.1份三辛基甲基氯化铵，反应1.5h后，有黄色固体粉末析出，抽滤，水洗涤后得到7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③，其中苄基三乙基氯化铵和三辛基甲基氯化铵作为相催化剂，大大提高的反应速率，缩短了反应时间，产物7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯纯度增加；

[0049] 4)在圆底烧瓶中，加入8份7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③及100份乙醇，后加入10份苯甲酰肼，回流反应3h，反应过程中有大量固体析出，冷却抽滤得橙黄色固体即为7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲④，通过步骤3得到的纯度高7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯作为反应物从而使得最终产物7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲的纯度也相应提高。

[0050] 可将步骤4)得到的其中1.5份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与4份乙醇、5份丙二醇、1份聚乙二醇组合制成注射剂；将其中3份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与4份二甘醇、0.5份三乙酸甘油酯、0.5份甘油、4份碳酸钙、2份低取代羟丙基甲基纤维素、0.8份硬脂酸镁、0.1份滑石粉、1份淀粉组合制成片剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与0.5份甘油、4份糊精、1份聚维酮、2份十八醇、1份硬脂酸、0.5份微晶纤维素、0.5份乳糖组合制成丸剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与1份甘露醇、1份碳酸氢钠、1份碳酸钙、
2份低取代羟丙基甲基纤维素、0.5份硬脂酸镁、0.5滑石粉组合制成胶囊；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与4份乙醇、1份丙二醇、2份聚乙二醇、1份碳酸钙、1份低取代羟丙基甲基纤维素、1份硬脂酸镁组合制成悬浮剂；将其中3份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与
3份乙醇、1份丙二醇、3份聚乙二醇、2份甘油、1份糊精、2份淀粉、0.2份乳糖组合制成乳剂。

[0051] 实施例3

[0052] 一种苯并(c)吖啶衍生物，其具有结构式：

[0053]

[0054] 所述苯并(c)吖啶衍生物的合成路线如下：

[0055]

[0056] 7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲④的制备，其具体步骤如下：

[0057] 以下原料按重量份数计：

[0058] 1)在三颈瓶中，加入40份邻溴苯甲酸、25份萘胺、31份碳酸钾和2.5份铜粉，加入100份正戊醇作为溶剂，180℃反应1小时后，减压除去正戊醇后，再加入1100份水，温度为50℃反应15分钟，过滤后用水洗涤滤饼，收集洗涤后的水与滤液合并，用浓盐酸酸化至PH值为
2.5，析出大量紫黑色沉淀，抽滤，所得黑色固体用丙酮重结晶，干燥后得到N-萘基邻氨基苯甲酸①，正戊醇作为溶剂能很好的溶解邻溴苯甲酸和萘胺，从而提高了反应产物的产率；

[0059] 2)在圆底烧瓶中，加入上述得到的35份N-萘基邻氨基苯甲酸①及18份三氯氧磷，在20分钟内将反应物的温度加热至98℃，反应物沸腾反应，待沸腾趋缓，将温度升高至170℃，反应1小时后，冷却至室温，将圆底烧瓶中的物质缓慢倾入浓氨水、碎冰和氯仿的混合物中，其中待固体完全溶解，静止后分离出氯仿层，水层再用氯仿萃取3次，合并氯仿萃取液，用无水氯化钙干燥10小时后，过滤，蒸除溶剂，得到7-氯苯并(c)吖啶②；

[0060] 3)在圆底烧瓶中，加入18份7-氯苯并(c)吖啶②及150份丙酮，回流溶解后加入5份硫氰化钠、0.08份苄基三乙基氯化铵和0.03份三辛基甲基氯化铵，反应1h后，有黄色固体粉末析出，抽滤，水洗涤后得到7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③，其中苄基三乙基氯化铵和三辛基甲基氯化铵作为相催化剂，大大提高的反应速率，缩短了反应时间，产物7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯纯度增加；

[0061] 4)在圆底烧瓶中，加入20份7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯③及80份乙醇，后加入30份苯甲酰肼，回流反应3h，反应过程中有大量固体析出，冷却抽滤得橙黄色固体即为7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲④，通过步骤3得到的纯度高7-苯并(c)吖啶异硫氰酸酯作为反应物从而使得最终产物7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲的纯度也相应提高。

[0062] 可将步骤4)得到的其中1份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与5份乙醇、2份丙二醇、2份聚乙二醇组合制成注射剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与1份二甘醇、1份三乙酸甘油酯、3份碳酸钙、1份低取代羟丙基甲基纤维素、0.5份硬脂酸镁、0.2份滑石粉、3份糊精组合制成片剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与1份甘油、2份糊精、
0.5份聚维酮、1.5份十八醇、0.5份硬脂酸、1份乳糖组合制成丸剂；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与0.5份甘露醇、1.5份碳酸氢钠、2份低取代羟丙基甲基纤维素、1份硬脂酸镁、0.5滑石粉组合制成胶囊；将其中2份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与3份乙醇、1份丙二醇、0.5份碳酸钙、1份低取代羟丙基甲基纤维素、1份硬脂酸镁组合制成悬浮剂；将其中
1份7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲与2份乙醇、2份丙二醇、1.5份聚乙二醇、1份甘油、1份淀粉、0.3份乳糖组合制成乳剂。

[0063] 下面通过实验来进一步说明7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲药物活性及其应用[0064] 体外抗肿瘤活性实验

[0065] 采用MTT方法，进行体外细胞毒性测定。将实施例1-3得到的7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲分别与胃癌MGC-803、BEL-7404、NCI-H460细胞株作用时间72小时，结果如表1所示：

[0066] 表1 7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲对肿瘤细胞株的半数有效浓度(IC50)

[0067]

[0068] 从表1的结果可以看出，本发明的7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲经体外抗肿瘤实验表明，该化合物具有强的抗肿瘤活性。本发明为研究开发新的7-苯并(c)吖啶型抗肿瘤药物提供了新的思路。

[0069] 尽管发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的配比示例。

[0022] 图1为7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲核磁共振氢谱；

[0023] 图2为7-苯并(c)吖啶苯甲酰胺基硫脲核磁共振碳谱。