一种细菌纤维素薄膜的液体培养基制备方法   0    0

本发明涉及一种细菌纤维素薄膜的液体培养基的制备方法。首先进行大米糖化醪液和丢糟降解液的预制备，混合后成细菌纤维素薄膜的液体培养基，其特征是将大米清洗后清水浸泡、沥干、蒸饭，加入根霉米粉倒入酒缸内进行搭窝糖化，冲入热水养醅后得大米糖化醪液备用；在丢糟中加入热水和复合酶进行酶解，得到丢糟降解液备用；将丢糟降解液和大米糖化醪液按1：1.5～3的重量份比例混合，离心并回收清液，进行pH值、糖度调整制成本发明所述的细菌纤维素薄膜液体培养基。本发明制备的液体培养基，与现有常用HS培养基相比，培养基原料成本低，营养成分丰富，膜片厚度为＞10mm，得率提高到7.2～7.8g/L，发酵周期时间缩短1.5～3d。

1.一种细菌纤维素薄膜的液体培养基制备方法，首先利用大米进行大米糖化醪液的预制备，再进行丢糟降解液的预制备，混合后制备成细菌纤维素薄膜的液体培养基，其特征在于：
所述的大米糖化醪液的预制备，其过程是：
（1）蒸饭：将大米清洗后清水浸泡、沥干，倒入立式蒸饭机连续蒸饭，饭粒熟透；
（2）淋饭搭窝：常温下将熟透饭粒与根霉米粉拌匀成混合料，倒入酒缸内，压平实，中间挖个井状窝进行搭窝糖化；
（3）经过搭窝糖化60～72 h后，井状窝中出现少量糖化液，此时冲入90～100℃热水以减缓糖化速率，搅拌均匀进行养醅，养醅2～3 d后得大米糖化醪液备用；
所述的丢糟降解液的预制备，其过程是：
在丢糟中加入 50℃热水和复合酶，搅拌混合进行6 h酶解，得到丢糟降解液备用；
所述的细菌纤维素薄膜液体培养基的制备，其过程是：
（1）将丢糟降解液和大米糖化醪液按1：1.5～3的重量份比例混合，混合后以4000r/min进行离心，回收清液；
（2）测定清液糖度并进行调整糖度至12°Brix；
（3）同时采用1mol/L柠檬酸溶液调节清液的pH值至3.0～4.5，即制成本发明所述的细菌纤维素薄膜液体培养基；
所述的复合酶，其组份为：葡聚糖酶40％，由枯草杆菌制备的蛋白酶40％、纤维素酶
20％；
所述的根霉米粉，其制作过程如下：CICC3066台湾根霉（Rhizopus formosaensis）菌株接到试管PDA培养基中活化培养72h待用；将过60目大米粉80g装入500mL的三角瓶中，塞上棉花塞包牛皮纸，高压锅杀菌成根霉米粉培养基备用；挑取试管PDA培养基中经活化培养的根霉菌丝接入根霉米粉培养基中，放入33℃培养箱中，进行48h扩大培养；在超净工作台上将根霉米粉培养基中经扩大培养根霉用接种铲挖取约40g，接入经杀菌的装有1 kg米粉的面盆中，拌匀混匀，盖上盆盖，放到33℃培养室中进行培养，培养过程品温不超过
36℃，培养48 h后即制成根霉米粉备用；当品温超过36℃时，翻盖迅速用无菌玻棒松动米粉降温。

2.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素薄膜的液体培养基制备方法，其特征在于所述的丢糟降解液酶解，酶解条件为：品温45～52℃，pH6.0。

3.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素薄膜的液体培养基制备方法，其特征在于所述的丢糟中加入热水和复合酶，是按一下比例加入的：100重量份丢糟加30～40重量份热水，100重量份丢糟加0.75重量份的复合酶。

4.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素薄膜的液体培养基制备方法，其特征在于所述的淋饭搭窝中，熟透饭粒与根霉米粉混合料是按100重量份的大米拌入8～12重量份根霉米粉；倒入酒缸内的混合料占酒缸容量的55～65%。

5.根据权利要求1所述的一种细菌纤维素薄膜的液体培养基制备方法，其特征在于所述的淋饭搭窝糖化后冲入热水的量是大米重量的1.5～1.8倍。