[0025] 为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述 只是为了进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。
[0026] 实施例1
[0027] 一种壳聚糖交联抗菌纳米纤维膜及其制备方法，包括如下步骤：
[0028] 1、将0.6g大豆卵磷脂、0.2g胆固醇与0.4ml松油烯‑4‑醇加入到20ml氯仿中，充分搅拌使其完全溶解， 室温下旋蒸除去氯仿，然后用注射器以5ml/min的速度将其注入到6倍体积的含4g/L MAP的水中，再以 11000r/min速度均质，用15g/L聚乙烯醇6000溶液透析浓缩至1/6体积，制得松油烯‑4‑醇脂质体；
[0029] 2、将0.15g BHT、4.5g苦杏仁粉碎后与3g橄榄苦苷酸一同加入到60ml PBS缓冲液中，冰浴下以 11000r/min速度均质7min，再在24℃下搅拌反应9h，过滤超滤后，以180℃进口温度，60℃出口温度， 15ml/min进料速率喷雾干燥制得抗菌保护交联剂；
[0030] 3、将1g相对分子量为40kDa，脱乙酰度为90％的壳聚糖与0.15g相对分子质量为6
10 的聚氧化乙烯 溶于50ml 90％乙酸溶液，充分搅拌，加入0.4ml松油烯‑4‑醇脂质体和
0.3g抗菌保护交联剂，在电压15kV， 流速0.7ml/h，接收距离15cm的条件下静电纺丝成壳聚糖交联纳米纤维膜A，其扫描电镜图如图1所示。
[0031] 实施例2
[0032] 一种壳聚糖交联抗菌纳米纤维膜及其制备方法，包括如下步骤：
[0033] 1、将0.5g大豆卵磷脂、0.1g胆固醇与0.3ml松油烯‑4‑醇加入到20ml氯仿中，充分搅拌使其完全溶解， 室温下旋蒸除去氯仿，然后用注射器以4ml/min的速度将其注入到5倍体积的含3g/L DMSS的水中，再以 10000r/min速度均质，用10g/L聚乙烯醇6000溶液透析浓缩至1/5体积，制得松油烯‑4‑醇脂质体；
[0034] 2、将0.1g BHA、4g苦杏仁粉碎后与2g橄榄苦苷酸一同加入到50ml PBS缓冲液中，冰浴下以10000r/min 速度均质5min，再在20℃下搅拌反应8h，过滤超滤后，以160℃进口温度，40℃出口温度，10ml/min进 料速率喷雾干燥制得抗菌保护交联剂；
[0035] 3、将1g相对分子量为20kDa，脱乙酰度为80％的壳聚糖与0.1g相对分子质量为105的聚氧化乙烯溶 于50ml 90％乙酸溶液，充分搅拌，加入0.2ml松油烯‑4‑醇脂质体和0.2g抗菌保护交联剂，在电压12kV， 流速0.5ml/h，接收距离12cm的条件下静电纺丝成壳聚糖交联纳米纤维膜B。
[0036] 实施例3
[0037] 一种壳聚糖交联抗菌纳米纤维膜及其制备方法，包括如下步骤：
[0038] 1、将0.7g大豆卵磷脂、0.3g胆固醇与0.5ml松油烯‑4‑醇加入到20ml氯仿中，充分搅拌使其完全溶解， 室温下旋蒸除去氯仿，然后用注射器以6ml/min的速度将其注入到7倍体积的含5g/L CDEA的水中，再以 12000r/min速度均质，用20g/L聚乙烯醇6000溶液透析浓缩至1/7体积，制得松油烯‑4‑醇脂质体；
[0039] 2、将0.2g TBHQ、5g苦杏仁粉碎后与4g橄榄苦苷酸一同加入到75ml PBS缓冲液中，冰浴下以 12000r/min速度均质8min，再在28℃下搅拌反应10h，过滤超滤后，以200℃进口温度，80℃出口温度， 20ml/min进料速率喷雾干燥制得抗菌保护交联剂；
[0040] 3、将1g相对分子量为50kDa，脱乙酰度为100％的壳聚糖与0.2g相对分子质量为7
10 的聚氧化乙烯 溶于50ml 90％乙酸溶液，充分搅拌，加入0.5ml松油烯‑4‑醇脂质体和
0.4g抗菌保护交联剂，在电压18kV， 流速1ml/h，接收距离20cm的条件下静电纺丝成壳聚糖交联纳米纤维膜C。
[0041] 对比例1(少抗氧化剂)
[0042] 一种壳聚糖交联纳米纤维膜及其制备方法，包括如下步骤：
[0043] 1、将0.6g大豆卵磷脂、0.2g胆固醇与0.4ml松油烯‑4‑醇加入到20ml氯仿中，充分搅拌使其完全溶解，室 温下旋蒸除去氯仿，然后用注射器以5ml/min的速度将其注入到6倍体积的含4g/L MAP的水中，再以 11000r/min速度均质，用15g/L聚乙烯醇6000溶液透析浓缩至1/6体积，制得松油烯‑4‑醇脂质体；
[0044] 2、将4.5g苦杏仁粉碎后与3g橄榄苦苷酸一同加入到60ml PBS缓冲液中，冰浴下以11000r/min速度均质 7min，再在24℃下搅拌反应9h，过滤超滤后，以180℃进口温度，60℃出口温度，15ml/min进料速率喷 雾干燥制得抗菌保护交联剂；
[0045] 3、将1g相对分子量为40kDa，脱乙酰度为90％的壳聚糖与0.15g相对分子质量为6
10 的聚氧化乙烯溶于 50ml 90％乙酸溶液，充分搅拌，加入0.4ml松油烯‑4‑醇脂质体和
0.3g抗菌保护交联剂，在电压15kV，流 速0.7ml/h，接收距离15cm的条件下静电纺丝成壳聚糖交联纳米纤维膜D。
[0046] 对比例2(少苦杏仁)
[0047] 一种壳聚糖交联纳米纤维膜及其制备方法，包括如下步骤：
[0048] 1、将0.6g大豆卵磷脂、0.2g胆固醇与0.4ml松油烯‑4‑醇加入到20ml氯仿中，充分搅拌使其完全溶解，室 温下旋蒸除去氯仿，然后用注射器以5ml/min的速度将其注入到6倍体积的含4g/L MAP的水中，再以 11000r/min速度均质，用15g/L聚乙烯醇6000溶液透析浓缩至1/6体积，制得松油烯‑4‑醇脂质体；
[0049] 2、将0.15g BHT与3g橄榄苦苷酸一同加入到60ml PBS缓冲液中，冰浴下以11000r/min速度均质7min， 再在24℃下搅拌反应9h，过滤超滤后，以180℃进口温度，60℃出口温度，15ml/min进料速率喷雾干燥制 得抗菌保护交联剂；
[0050] 3、将1g相对分子量为40kDa，脱乙酰度为90％的壳聚糖与0.15g相对分子质量为6
10 的聚氧化乙烯溶于 50ml 90％乙酸溶液，充分搅拌，加入0.4ml松油烯‑4‑醇脂质体和
0.3g抗菌保护交联剂，在电压15kV，流 速0.7ml/h，接收距离15cm的条件下静电纺丝成壳聚糖交联纳米纤维膜E。
[0051] 对比例3(少橄榄苦苷酸)
[0052] 一种壳聚糖交联纳米纤维膜及其制备方法，包括如下步骤：
[0053] 1、将0.6g大豆卵磷脂、0.2g胆固醇与0.4ml松油烯‑4‑醇加入到20ml氯仿中，充分搅拌使其完全溶解，室 温下旋蒸除去氯仿，然后用注射器以5ml/min的速度将其注入到6倍体积的含4g/L MAP的水中，再以 11000r/min速度均质，用15g/L聚乙烯醇6000溶液透析浓缩至1/6体积，制得松油烯‑4‑醇脂质体；
[0054] 2、将0.15g BHT与4.5g苦杏仁粉碎后一同加入到60ml PBS缓冲液中，冰浴下以11000r/min速度均质7min， 再在24℃下搅拌反应9h，过滤超滤后，以180℃进口温度，60℃出口温度，15ml/min进料速率喷雾干燥制 得抗菌保护交联剂；
[0055] 3、将1g相对分子量为40kDa，脱乙酰度为90％的壳聚糖与0.15g相对分子质量为6
10 的聚氧化乙烯溶于 50ml 90％乙酸溶液，充分搅拌，加入0.4ml松油烯‑4‑醇脂质体和
0.3g抗菌保护交联剂，在电压15kV，流 速0.7ml/h，接收距离15cm的条件下静电纺丝成壳聚糖交联纳米纤维膜F。
[0056] 力学性能测试
[0057] 用日本Kato‑Tech公司KES‑G1型多功能拉伸试验仪对实施例1‑3和对比例1‑3的纳米纤维膜进行单轴 拉伸测试，试样尺寸6cm×0.5cm，夹持距离4cm，拉伸速率0.05cm/s。纳米纤维力学性能测试结果如表1 所示。
[0058] 表1纳米纤维力学性能测试结果
[0059] 样品 最大拉伸应力(MPa) 最大拉伸应变(％) 杨氏模量(MPa)实施例1 17.6±0.2 80.8±1.6 0.22±0.01
实施例2 16.5±0.5 67.7±2.2 0.24±0.00
实施例3 16.3±0.3 73.4±2.6 0.22±0.00
对比例1 12.0±0.5 50.1±4.2 0.24±0.01
对比例2 12.4±0.4 45.8±2.6 0.27±0.02
对比例3 11.6±0.1 47.9±2.6 0.24±0.01
[0060] 根据表1可知，本发明实施例制备的纳米纤维膜的最大拉伸应力比对比例的提高了4～6MPa，最大拉 伸应变也提高了30～70％。而实施例和对比例纳米纤维膜的杨氏模量没有显著差异。
[0061] 抗菌性能测试
[0062] 取1g上述实施例1‑3和对比例1‑3制备的纳米纤维膜放入透析袋中置于200ml PBS缓冲液，磁力搅拌 进行释放。经过一段时间释放后取出材料，利用AATCC100‑2004标准检验材料对金黄色葡萄球菌和大肠 杆菌的抑菌效果，测试结果如图2所示。图2中，A为实施例1的抑菌时间曲线，B为实施例2的抑菌时 间曲线，C为实施例3的抑菌时间曲线，D为对比例1的抑菌时间曲线，E为对比例2的抑菌时间曲线，F 为对比例3的抑菌时间曲线。
[0063] 根据图2可以发现实施例1‑3制备的纳米纤维膜在释放至21d后仍能保持对金黄色葡萄球菌和大肠杆 菌较佳的抑菌效果，而对比例1‑3制备的纳米纤维膜释放3d后对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率均降 至40％以下，释放至6d后对金黄色葡萄球菌可检测的抑菌效果消失，释放至9d后对大肠杆菌可检测的抑 菌效果消失。结果说明本发明制备的纳米纤维膜具有更加优良的缓释抗菌性能。
[0064] 本发明提供了一种壳聚糖交联抗菌纳米纤维膜及其制备方法的思路及方法，具体实现该技术方案的方 法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说， 在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。 本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。
