实施方案
[0015] 根据此工艺采用的蒽醌类化合物测定方法为:精密吸取1,8-二羟基蒽醌对照品溶液(0.522 mg/ml)1、3、5、8、10、15 ml,分别置25ml容量瓶中,挥去甲醇,残渣用0.5%醋酸镁乙醇溶液溶解并稀释至刻度,摇匀,于425 nm 处,以0.5%醋酸镁乙醇溶液作参比测定吸收度。以1,8-二羟基蒽醌含量(y)对吸收度(x)进行线性回归分析,得线性回归方程。精密吸取样品溶液重复上述操作测定吸收度,利用线性回归方程计算各样品中总蒽醌的含量。
[0016] 蒽醌类化合物去除率Re按下列公式(1)计算:
[0017] (1)
[0018] 式中,Rt为t时间蒽醌类化合物的去除率;C0 (mg/L) 为0小时的蒽醌类化合物浓度;Ct (mg/L ) 为吸附t小时蒽醌类化合物的浓度。
[0019] 为了进一步阐述本发明的技术方案所涉及的材料及工艺,给出了以下实施例,但是这些实施例不以任何形式限制本发明的范围。
[0020] 实施例1
[0021] 1. 试管斜面菌种的制作
[0022] 在新配置的马铃薯蔗糖培养基(诸葛健、王正祥主编的“工业微生物实验技术手册”,1994,367页)中接入一环黄孢原毛平革菌菌种(中国普通微生物菌种保藏管理中心CCGMC5.776),26℃,培养时间50小时;4℃保存备用。
[0023] 2. 液体摇瓶培养菌种的制作
[0024] 精确称取葡萄糖5克,蛋白胨0克,酵母膏5克,硫酸镁0.2克,吐温-80 0.5克,磷酸二氢钾2克,水1000 mL, pH 5,分装250mL三角瓶,每瓶50克,共20瓶,120 ℃灭菌6
40分钟;冷却后,每瓶接入一环4℃保存的黄孢原毛平革菌菌种(1×10 个孢子),在25℃,
150转/分,培养 72小时;
[0025] 3. 菌体液体扩大培养
[0026] 精确称取葡萄糖50克,蛋白胨0克,酵母膏50克,硫酸镁2克,吐温-80 5克,磷酸二氢钾20克,水10L,装于15L的种子罐中,120℃灭菌20分钟;灭菌冷却后,在温度25 ℃,搅拌转速50 转/分,通气量0.2 :1体积/体积/分钟(通气气体体积/发酵液体积/分钟),培养 72小时;培养液经过3000rpm离心20分钟,得到黄孢原毛平革菌菌体。
[0027] 4. 去除废水中蒽醌类化合物
[0028] 以大黄为原料,采用水煎法提取蒽醌类化合物的废液经过浓缩,蒽醌类化合物浓度为1克/L的废液1000L,菌体与废液按1:50(质量/体积)混合,在温度25℃,搅拌转速60转/分,通气量0.3:1体积/体积/分钟(通气气体体积/发酵液体积/分钟),反应3小时后,蒽醌类化合物去除率达到71.3%。
[0029] 实施例2
[0030] 1. 试管斜面菌种的制作
[0031] 在新配置的马铃薯蔗糖培养基(诸葛健、王正祥主编的“工业微生物实验技术手册”,1994,367页)中接入一环黄孢原毛平革菌菌种(中国农业微生物菌种保藏管理中心ACCC 30942),30℃,培养时间100小时;7℃保存备用。
[0032] 2. 液体摇瓶培养菌种的制作
[0033] 精确称取葡萄糖150克,蛋白胨25克,酵母膏25克,硫酸镁0.4克,吐温-80 4克,磷酸二氢钾5克,水10 L, pH 6,分装250mL三角瓶,每瓶100克,共100瓶,130℃灭菌306
分钟;冷却后,每瓶接入一环7℃保存的黄孢原毛平革菌菌种(1×10 个孢子),在30℃,150转/分,培养50小时;
[0034] 3. 菌体液体扩大培养
[0035] 精确称取葡萄糖2000克,蛋白胨250克,酵母膏250克,硫酸镁60克,吐温-80 60克,磷酸二氢钾400克,水100L,装于130L的种子罐中,130℃灭菌30分钟;冷却后,在温度