[0033] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的详述，以更好地理解本发明的内容，但本发明并不限于以下实施例。
[0034] 以下各实施例中涉及的2‑苯基吡啶(H‑ppy)铱二聚体均按下述方法制备得到：
[0035] 取2‑苯基吡啶2.4mmol、三水合三氯化铱1.2mmol、乙二醇乙醚18mL去离子水6mL置于50mL的烧瓶后，氮气保护，加热至120℃冷凝回流24h，反应结束后，自然冷却至室温，向反应液中倒入200mL去离子水，搅拌析出大量黄色沉淀，过滤，滤饼依次用水和乙醇洗涤，之后于45℃条件下真空干燥，得到黄色固体，即为2‑苯基吡啶铱二聚体。
[0036] 实施例1：配合物Ir1的合成
[0037] 在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的氯喹那多(H‑QL1)与1.0mmol的2‑苯基吡啶铱二聚体，然后加入16.5mL有机溶剂(由15.0mL的乙醇和1.5mL的水组成)，搅拌溶解，在70℃下进行反应至完全(约12h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率90.21％。
[0038] 对本实施例所得产物进行表征：
[0039] (1)X‑射线单晶衍射
[0040] 通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如下述表1所示，部分键长键角数据分别如下述表2和表3所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图1所示。
[0041] 表1.配合物Ir1‑Ir3的晶体学和结构修正数据
[0042]
[0043]
[0044] aR1＝Σ||Fo|–|Fc||/Σ|Fo|；bwR2＝[Σw(Fo2–Fc2)2/Σw(Fo2)2]1/2.[0045] 表2.配合物Ir1的健长
[0046]
[0047] 表3.配合物Ir1的键角[°]
[0048]
[0049]
[0050] (2)元素分析(C32H22Cl2IrN3O)结果，如表4所示。
[0051] 表4.配合物Ir1‑Ir3的元素分析结果
[0052]
[0053] (3)红外光谱，其红外数据如下所示。
[0054] IR(KBr):3449,1635,1604,1542,1425,1357,1263,1158,1030,936,844,756,731,‑1466,418cm .
[0055] (4)电喷雾质谱，其解析如下。
[0056] ESI‑MS m/z:727.7[M+H]+，其中M为配合物Ir1的分子量。
[0057] 因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir1，其分子式为[Ir(QL1)(ppy)2](其中QL1表示氯喹那多脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppy表示2‑苯基吡啶脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：
[0058]
[0059] 实施例2：配合物Ir1的合成
[0060] 重复实施例1，不同的是，有机溶剂改为乙醇，用量不变；反应改在100℃下进行(反应至完全约6h)。
[0061] 结果得到红棕色晶体。产率85.31％。
[0062] 对本实施例所得产物进行单晶衍射分析、元素分析、红外分析及质谱分析，确定所得的红棕色晶体为目标配合物Ir1。
[0063] 实施例3：配合物Ir2的合成
[0064] 在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的5,7‑二溴‑2‑甲基‑8‑羟基喹啉(H‑QL2)与1.0mmol的2‑苯基吡啶铱二聚体，然后加入16.5mL有机溶剂(由3.5mL的乙醇和10.5mL的三氯甲烷组成)，搅拌溶解，在65℃下进行反应至完全(约27h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率80.46％。
[0065] 对本实施例所得产物进行表征：
[0066] (1)X‑射线单晶衍射
[0067] 通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如上述表1所示，部分键长键角数据分别如下述表5和表6所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图2所示。
[0068] 表5.配合物Ir2的健长
[0069]
[0070]
[0071] 表6.配合物Ir2的键角[°]
[0072]
[0073]
[0074]
[0075] (2)元素分析(C32H22Br2IrN3O)结果，如上述表4示。
[0076] (3)红外光谱，其红外数据如下所示。
[0077] IR(KBr):3462,1637,1604,1539,1476,1423,1352,1266,1158,1116,1029,924,‑1841,755,731cm .
[0078] (4)电喷雾质谱，其解析如下所示。
[0079] ESI‑MS m/z:815.8[M+H]+，其中M为配合物Ir2的分子量。
[0080] 因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir2，其分子式为[Ir(QL2)(ppy)2](其中QL2表示5,7‑二溴‑2‑甲基‑8‑羟基喹啉脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppy表示2‑苯基吡啶脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：
[0081]
[0082] 实施例4：配合物Ir2的合成
[0083] 重复实施例1，不同的是，有机溶剂改为由1.0mL的乙醇、10.0mL的丙酮和9.0mL的二氯甲烷组成；反应改在40℃下进行(反应至完全约30h)。
[0084] 结果得到红棕色晶体。产率74.06％。
[0085] 对本实施例所得产物进行单晶衍射分析、元素分析、红外分析及质谱分析，确定所得的红棕色晶体为目标配合物Ir2。
[0086] 实施例5：配合物Ir3的合成
[0087] 在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的5,7‑二碘‑8‑羟基喹啉(H‑QL3)与1.0mmol的2‑苯基吡啶铱二聚体，然后加入25.0mL有机溶剂(由20.0mL的乙醇和5.0mL的DMF组成)，搅拌溶解，在100℃下进行反应至完全(约72h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率90.54％。
[0088] 对本实施例所得产物进行表征：
[0089] (1)X‑射线单晶衍射
[0090] 通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如上述表1所示，部分键长键角数据分别如下述表7和表8所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图3所示。
[0091] 表7.配合物Ir3的健长
[0092]
[0093] 表8.配合物Ir3的键角[°]
[0094]
[0095] (2)元素分析(C31H20I2IrN3O)结果，如上述表4所示。
[0096] (3)红外光谱，其红外数据如下所示。
[0097] IR(KBr):3452,1637,1476,1385,1040,645cm‑1.
[0098] (4)电喷雾质谱，其解析如下。
[0099] ESI‑MS m/z:897.3[M+H]+，其中M为配合物Ir3的分子量。
[0100] 因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir3，其分子式为[Ir(QL3)(ppy)2](其中QL2表示5,7‑二碘‑8‑羟基喹啉脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppy表示2‑苯基吡啶脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：
[0101]
[0102] 实施例6：配合物Ir4的合成
[0103] 在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的5‑氯‑8‑羟基喹啉(H‑QL6)与1.0mmol的2‑苯基吡啶铱二聚体，然后加入15.5mL有机溶剂(由15.0mL的乙醇和0.5mL的二甲基亚砜组成)，搅拌溶解，在55℃下进行反应至完全(约36h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率80.00％。
[0104] 对本实施例所得产物进行表征：
[0105] (1)X‑射线单晶衍射
[0106] 通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如下述表9所示，部分键长键角数据分别如下述表10和表11所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图4所示。
[0107] 表9.配合物Ir4‑Ir5的晶体学和结构修正数据
[0108]
[0109]
[0110] aR1＝Σ||Fo|–|Fc||/Σ|Fo|；bwR2＝[Σw(Fo2–Fc2)2/Σw(Fo2)2]1/2.[0111] 表10.配合物Ir4的健长
[0112]
[0113] 表11.配合物Ir4的键角[°]
[0114]
[0115]
[0116] (2)元素分析(C31H21ClIrN3O)结果，如表12所示。
[0117] 表12.配合物Ir4‑Ir5的元素分析结果
[0118]
[0119] (3)红外光谱，其红外数据如下所示。
[0120] IR(KBr):3450,1634,1577,1538,1426,1352,1117,1037,937,782,731,666cm‑1.[0121] (4)电喷雾质谱，其解析如下所示。
[0122] ESI‑MS m/z:845.5[M+DMSO+H]+，其中M为配合物Ir4的分子量。
[0123] 因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir4，其分子式为[Ir(QL6)(ppy)2](其中QL6表示5‑氯‑8‑羟基喹啉脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppy表示2‑苯基吡啶脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：
[0124]
[0125] 实施例7：配合物Ir5的合成
[0126] 在100.0mL圆底烧瓶中，分别加入2.0mmol的8‑羟基喹哪啶(H‑QL7)与1.0mmol的2‑苯基吡啶铱二聚体，然后加入22.5mL有机溶剂(由2.5mL的乙醇和20mL的水组成)，搅拌溶解，在80℃下进行反应至完全(约6h)，停止反应，冷却至室温，有红棕色晶体析出，收集晶体，干燥，得到红棕色固体产物。产率80.33％。
[0127] 对本实施例所得产物进行表征：
[0128] (1)X‑射线单晶衍射
[0129] 通过单晶衍射测定表面结构完好的红棕色晶体以确定其晶体结构，所得晶体学和结构修正数据如上述表9所示，部分键长键角数据分别如下述表13和表14所示，所得红棕色晶体的晶体结构如图5所示。
[0130] 表13.配合物Ir5的健长
[0131]
[0132]
[0133] 表14.配合物Ir5的键角[°]
[0134]
[0135]
[0136] (2)元素分析(C32H24IrN3O)结果，如上述表12所示。
[0137] (3)红外光谱，其红外数据如下所示。
[0138] IR(KBr):3452,1638,1605,1581,1555,1452,1424,1385,1159,1109,1059,829,‑1760,737,668,472cm .
[0139] (4)电喷雾质谱，其解析如下。
[0140] ESI‑MS m/z:657.7[M+H]+，其中M为配合物Ir5的分子量。
[0141] 因此，可以确定本实施例所得产物为目标配合物Ir5，其分子式为[Ir(QL7)(ppy)2](其中QL7表示8‑羟基喹哪啶脱去羟基氢原子，带一个单位负电荷，ppy表示2‑苯基吡啶脱去一个氢原子，带一个单位负电荷)，化学结构式如下：
[0142]
[0143] 实施例8：配合物Ir5的合成
[0144] 重复实施例7，不同的是，反应改在常温下进行(反应至完全约4天)。
[0145] 结果得到红棕色晶体。产率86.32％。
[0146] 对本实施例所得产物进行单晶衍射分析、元素分析、红外分析及质谱分析，确定所得的红棕色晶体为目标配合物Ir5。
[0147] 实验例1：配合物Ir1‑Ir5对多种人肿瘤细胞株的增殖抑制活性实验：
[0148] 1、细胞株与细胞培养
[0149] 本实验选用人宫颈癌HeLa、人卵巢癌耐顺铂SK‑OV‑3/DDP细胞株和人正常肝细胞HL‑7702。
[0150] 所有细胞株均培养在含10wt％小牛血、100U/mL青霉素、100U/mL链霉素的RPMI‑1640培养液内，置37℃含体积浓度5％CO2孵箱中培养。
[0151] 2、待测化合物的配制
[0152] 各待测化合物的纯度≥95％，将其DMSO储液用生理缓冲液稀释后配制成20μmol/L的终溶液，其中助溶剂DMSO的终浓度≤1％，测试该浓度下待测化合物对各种肿瘤细胞生长的抑制程度。
[0153] 3、细胞生长抑制实验(MTT法)
[0154] (1)取对数生长期的肿瘤细胞，经胰蛋白酶消化后，用含10％小牛血清的培养液配制成个数浓度为5000/mL的细胞悬液，以每孔190μL接种于96孔培养板中，使待测细胞密度至1000～10000孔(边缘孔用无菌PBS填充)；
[0155] (2)5％CO2，37℃孵育6.0h，至细胞单层铺满孔底，每孔加入一定浓度梯度的药物10μL，每个浓度梯度设4个复孔；
[0156] (3)5％CO2，37℃孵育48小时，倒置显微镜下观察；
[0157] (4)每孔加入10μL的MTT溶液(5mg/mL PBS，即0.5％MTT)，继续培养4h；
[0158] (5)终止培养，小心吸去孔内培养液，每孔加入150μL的DMSO充分溶解甲瓒沉淀，振荡器混匀后，在酶标仪用波长为570nm，参比波长为450nm测定各孔的光密度值；
[0159] (6)同时设置调零孔(培养基、MTT、DMSO)，对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、DMSO)。
[0160] (7)根据测得的光密度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强。
[0161]
[0162] 利用上述公式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率，再以Bliss法分别计算铱配合物对上述几种细胞株的IC50值。其结果如表15所示。
[0163] 表15.配合物Ir1‑Ir5对不同肿瘤细胞株的IC50值(μM，6.0h)
[0164]
[0165] 由表15的IC50结果可以看出，本发明所述的配合物对3种人细胞株均表现出一定的增殖抑制作用，尤其是对人宫颈癌细胞HeLa抑制效果最为明显，其活性明显高于顺铂、IrCl3·6H2O和相应的配体H‑QL1、H‑QL2、H‑QL3、H‑QL6、H‑QL7和H‑ppy；且这些配合物对正常细胞HL‑7702的毒性很小(IC50大于80μM)，具有较好的细胞毒性选择性。可见，本发明所述配合物具有较好的潜在药用价值，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。
[0166] 实验例2：配合物Ir1对HeLa细胞的靶向定位线粒体的成像实验
[0167] 1、实验步骤
[0168] (1)配合物Ir1(1.22μM)作用HeLa细胞6h；
[0169] (2)按照1:1000用无血清培养液稀释线粒体染液，使终浓度为50nM，去除细胞培养液后，加入适当体积稀释好的线粒体染液，加入的体积以充分盖住细胞为宜。
[0170] (3)37℃细胞培养箱内孵育20min。
[0171] (4)用无血清细胞培养液洗涤细胞3次，以充分去除未进入细胞内的线粒体染液；
[0172] (5)分别用DAPI(染核)和Mito‑green(染线粒体膜)染色10min，用无血清细胞培养液洗涤细胞3次；
[0173] (6)观察细胞内线粒体的情况。
[0174] 2、实验结果与讨论
[0175] 由图6可知，配合物Ir1(1.22μM)作用HeLa细胞6h后，主要分布在线粒体膜电位，与市场上的膜电位检测的荧光染料(Mito‑Green)重叠，且在线粒体膜部位呈红色，是一种良好的荧光染料。此外，从图中也可以看出，细胞核中几乎没有药物的分布，说明药物靶向于线粒体膜，从而诱导肿瘤细胞凋亡。
[0176] 综上，本发明所述的配合物Ir1–Ir5，总体表现出了明显的体外抗肿瘤活性和毒性选择性，具有良好的潜在药用价值，是一种具有荧光定位靶向于线粒体的靶向抗癌药物，有望用于各种抗肿瘤药物的制备。
