发明内容
[0004] 本发明所要解决的技术问题是提供一种海水环境中氯氰菊酯降解菌及其分离纯化和应用,该降解菌可安全、高效、快速的降解海水环境中氯氰菊酯,使其降解率达90%以上。
[0005] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种海水环境中氯氰菊酯降解菌,该菌为HS-12菌株,分类命名为海环站菌属(Mesonia sp.),于2012年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No. 6045,该菌株的16S rRNA的Genbank登陆号为JX087927。
[0006] 该菌株的生物学特征如下:革兰氏阴性,为杆菌,β-半乳糖甙酶、精氨酸双水解试验、柠檬酸盐试验、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧试验、V-P反应、明胶液化试验阳性,尿素酶试验、H2S反应、色氨酸脱羧酶、吲哚酶试验阴性,不可以利用蔗糖。
[0007] 该菌株海水中生长,最适生长温度25-30℃,最适生长pH为7.0-7.8,在固体培养基上,菌落圆形、较薄,呈白色,半透明。
[0008] 一种海水环境中氯氰菊酯降解菌的分离纯化方法,具体包括如下步骤:
[0009] (1)培养基配制
[0010] 将氯氰菊酯溶液加入到营养培养基中,使氯氰菊酯终浓度为100 mg/L,得到富集培养液;
[0011] (2)降解菌分离纯化
[0012] 取500 mL海水样品于无菌状态下过滤富集后,加入到富集培养液中,在温度28℃、转速180 rpm的条件下,培养7 d,重复上述操作过程3次,每次培养的接种物均取自前次所得培养液,将最后一次培养所得的培养液稀释8-10倍后,取100μL涂布于含100mg/L氯氰菊酯的固体平板上,28℃恒温培养箱中培养,直至菌落单一,将纯化后的各菌落分别接至富集培养液中振荡培养,在温度28℃、转速180 rpm的条件下,培养7 d,通过气相色谱-电子捕获器检测各富集培养液中拟除虫菊酯类农药残留量,最后筛选获得一株对氯氰菊酯农药具有高效降解能力的菌株,即氯氰菊酯降解菌HS-12菌株。
[0013] 所述的营养培养基配制方法如下:精确称取磷酸高铁0.01g、蛋白胨5.0g、酵母膏1.0g,加入过滤海水1000mL,混合均匀后,调节pH为7.0-7.8,于121℃高压蒸汽灭菌20 min后制得。
[0014] 一种海水环境中氯氰菊酯降解菌的应用,该菌株对氯氰菊酯具有较高的生物降解能力,可用于氯氰菊酯农药污染的海水及沉积物环境的生物修复。
[0015] 该菌株在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、氯氰菊酯农药浓度100mg/L的条件下,7 d后对海水中氯氰菊酯的降解率达到90 %以上。
[0016] 与现有技术相比,本发明的优点在于:本发明海水环境中氯氰菊酯降解菌,可安全、高效、快速的降解海水环境中残留的氯氰菊酯农药,在温度25-30℃、pH 7.0-7.8、农药浓度100mg/L的条件下,7d后对海水中氯氰菊酯的降解率为达到90.1%,进一步采用发光细菌法研究了微生物降解前后,海水中氯氰菊酯污染的生物毒性,结果表明,该菌株对海水中氯氰菊酯具有较好的降解效果,极大的消除了氯氰菊酯及其降解产物的生物毒性。
[0017] 综上所述,本发明从海水中分离出氯氰菊酯降解菌,对海水中氯氰菊酯具有较好的降解效果,对保护海洋生态环境、水产品安全及人类健康具有重要的意义,同时为拟除虫菊酯类农药农残降解研究提供了基础,开发前景广阔。
[0018] 上述海水环境中氯氰菊酯降解菌,该菌株分类命名为海环站菌属(Mesonia sp.)菌株为HS-12株,保藏编号为CGMCC No.6045,于2012年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所。